Isoelectroenfoque

Esta técnica, habitualmente denominada electroenfoque, se emplea ampliamente en bioquímica para separar moléculas cargadas. Se trata de un tipo de electroforesis.

Fundamento

Se basa en el desplazamiento de las moléculas en un gradiente de pH. Las moléculas anfotéricas, como los aminoácidos, se separan en un medio en el que existe una diferencia de potencial y un gradiente de pH. La región del ánodo es ácida y la del cátodo es alcalina. Las sustancias que inicialmente se encuentran en regiones de pH inferior a su punto isoeléctrico estarán cargadas positivamente y migraran hacia el cátodo, mientras aquellas que se encuentran en medios con pH más altos que su punto isoeléctrico tendrán carga negativa y migrarán hacia el ánodo. La migración las conducirá a una región donde el pH coincidirá con su punto isoléctrico, tendrán una carga neta nula y se detendrán. De esta forma las moléculas anfotéricas se sitúan en estrechas bandas donde coincide su punto isoeléctrico con el pH.

Referencias

Klose, J. (1975). "Protein mapping by combined isoelectric focusing and electrophoresis of mouse tissues." A two-dimensional gel electrophoresis system. Journal of Biochemical and Biophysical Methods, 2(5), 285-288. (DOI: 10.1016/0165-022x(75)90012-6)
O'Farrell, P. H. (1975). "High resolution two-dimensional electrophoresis of proteins." Journal of Biological Chemistry, 250(10), 4007-4021. (PMID: 236308)
Hjertén, S., & Mosbach, K. (1962). "Basic studies on molecular size and shape in solution by means of electrofocusing." Journal of Chromatography A, 8, 579-599. (DOI: 10.1016/S0021-9673(01)94767-2)
Righetti, P. G. (1983). "Isoelectric focusing: theory, methodology and applications." Elsevier Science Ltd. (ISBN: 978-0444804706)

Datos: Q898861