Wikipedia

Ácido desoxirribonucleico

ácido nucleico que contiene instrucciones genéticas usadas en el desarrollo y funcionamiento de los organismos vivos​ y algunos virus
(Redirigido desde «ADN genómico»)
«ADN» redirige aquí. Para otras acepciones, véase ADN (desambiguación).
«DNA» redirige aquí. Para otras acepciones, véase DNA (desambiguación).

El ácido desoxirribonucleico —conocido por las siglas ADN— es un ácido nucleico que contiene las instrucciones genéticas fundamentales para el desarrollo, funcionamiento y reproducción de todos los seres vivos[1]​ y algunos virus (los virus ADN); también es responsable de la transmisión hereditaria.[2]​ La función principal de la molécula de ADN es el almacenamiento a largo plazo de información para construir otros componentes de las células, como las proteínas y las moléculas de ARN. Los segmentos de ADN que llevan esta información genética son llamados genes, pero las otras secuencias de ADN tienen propósitos estructurales o toman parte en la regulación del uso de esta información genética.

Ubicación y estructura del ADN en una célula eucariota. Durante la división celular, el ADN se agrupa en cromosomas. El resto del tiempo, se encuentra disperso en forma de cromatina.
Animación de parte de una estructura de ADN de doble hélice.

Desde el punto de vista químico, el ADN es un polímero de nucleótidos, es decir, un polinucleótido.[3]​ Cada nucleótido, a su tiempo, está formado por un glúcido (la desoxirribosa), una base nitrogenada (que puede ser adenina→A, timina→T, citosina→C o guanina→G) y un grupo fosfato (derivado del ácido fosfórico). Lo que distingue a un polinucleótido de otro es, entonces, la base nitrogenada, y por ello la secuencia del ADN se especifica nombrando solo la secuencia de sus bases. La disposición secuencial de estas cuatro bases a lo largo de la cadena es la que codifica la información genética, siguiendo el siguiente criterio de complementariedad: A‑T y G‑C. Esto se debe a que la adenina y la guanina son de mayor tamaño que la timina y la citosina, por lo que este criterio permite cumplir una uniformidad. En los seres vivos, el ADN se presenta como una doble cadena de nucleótidos, en la que las dos hebras están unidas entre sí por unas conexiones denominadas puentes de hidrógeno.[4]​[5]​

Para que la información que contiene el ADN pueda ser utilizada por la maquinaria celular debe copiarse en primer lugar en unos trenes de nucleótidos, más cortos y con unas unidades diferentes, llamados ARN. Las moléculas de ARN se copian exactamente del ADN mediante un proceso denominado transcripción. Una vez procesadas en el núcleo celular, las moléculas de ARN pueden salir al citoplasma para su utilización posterior. La información contenida en el ARN se interpreta usando el código genético, que especifica la secuencia de los aminoácidos de las proteínas, según una correspondencia de un triplete de nucleótidos (codón) para cada aminoácido. Esto es, la información genética (esencialmente: qué proteínas se van a producir en cada momento del ciclo de vida de una célula) se halla codificada en las secuencias de nucleótidos del ADN y debe traducirse para poder funcionar. Tal traducción se realiza usando el código genético a modo de diccionario. El diccionario «secuencia de nucleótido-secuencia de aminoácidos» permite el ensamblado de largas cadenas de aminoácidos (las proteínas) en el citoplasma de la célula. Por ejemplo, en el caso de la secuencia de ADN indicada antes (ATGCTAGCATCG...), la ADN polimerasa utilizaría como molde la cadena complementaria de dicha secuencia de ADN (que sería TAC‑GAT‑CGT‑AGG‑...) para transcribir una molécula de ARNm que se leería AUG‑CUA‑GCA‑UCG‑...; el ARNm resultante, utilizando el código genético, se traduciría como la secuencia de aminoácidos metionina-leucina-ácido aspártico-arginina-...

Las secuencias de ADN que constituyen la unidad fundamental, física y funcional de la herencia se denominan genes. Cada gen contiene una parte que se transcribe a ARN y otra que se encarga de definir cuándo y dónde deben expresarse. La información contenida en los genes (genética) se emplea para generar ARN y proteínas, que son los componentes básicos de las células, los «ladrillos» que se utilizan para la construcción de los orgánulos u organelos celulares, entre otras funciones.

Dentro de las células, el ADN está organizado en estructuras llamadas cromosomas que, durante el ciclo celular, se duplican antes de que la célula se divida. Los organismos eucariotas (por ejemplo, animales, plantas y hongos) almacenan la mayor parte de su ADN dentro del núcleo celular y una mínima parte en elementos celulares llamados mitocondrias, y en los plastos y los centros organizadores de microtúbulos o centríolos, en caso de tenerlos; los organismos procariotas (bacterias y arqueas) lo almacenan en el citoplasma de la célula y, por último, los virus ADN lo hacen en el interior de la cápside de naturaleza proteica. Existen multitud de proteínas, como por ejemplo las histonas y los factores de transcripción, que se unen al ADN dotándolo de una estructura tridimensional determinada y regulando su expresión. Los factores de transcripción reconocen secuencias reguladoras del ADN y especifican la pauta de transcripción de los genes. El material genético completo de una dotación cromosómica se denomina genoma y, con pequeñas variaciones, es característico de cada especie.

Historia

editar
Artículo principal: Historia de la genética
 
Friedrich Miescher, biólogo y médico suizo (1844‑1895).
 

El ADN fue aislado por primera vez durante 1869, por el médico suizo Friedrich Miescher, mientras trabajaba en la Universidad de Tubinga. Miescher realizaba experimentos acerca de la composición química del pus de vendas quirúrgicas desechadas cuando notó un precipitado de una sustancia desconocida que caracterizó químicamente más tarde.[6]​[7]​ Lo llamó nucleína, debido a que lo había extraído a partir de núcleos celulares.[8]​ Se necesitaron casi 70 años de investigación para poder identificar los componentes y la estructura de los ácidos nucleicos.

En 1919 Phoebus Levene identificó que un nucleótido está formado por una base nitrogenada, un azúcar y un fosfato.[9]​ Levene sugirió que el ADN generaba una estructura con forma de solenoide (muelle) con unidades de nucleótidos unidos a través de los grupos fosfato. En 1930 Levene y su maestro Albrecht Kossel probaron que la nucleína de Miescher es un ácido desoxirribonucleico (ADN) formado por cuatro bases nitrogenadas (citosina (C), timina (T), adenina (A) y guanina (G), el azúcar desoxirribosa y un grupo fosfato, y que, en su estructura básica, el nucleótido está compuesto por un azúcar unido a la base y al fosfato.[10]​ Sin embargo, Levene pensaba que la cadena era corta y que las bases se repetían en un orden fijo. En 1937 William Astbury produjo el primer patrón de difracción de rayos X que mostraba que el ADN tenía una estructura regular.[11]​

 
Maclyn McCarty con Francis Crick y James D. Watson.

La función biológica del ADN comenzó a dilucidarse en 1928, con una serie básica de experimentos de la genética moderna realizados por Frederick Griffith, quien estaba trabajando con cepas «lisas» (S) o «rugosas» (R) de la bacteria Pneumococcus (causante de la neumonía), según la presencia (S) o no (R) de una cápsula azucarada, que es la que confiere virulencia (véase también experimento de Griffith). La inyección de neumococos S vivos en ratones produce la muerte de estos, y Griffith observó que, si inyectaba ratones con neumococos R vivos o con neumococos S muertos por calor, los ratones no morían. Sin embargo, si inyectaba a la vez neumococos R vivos y neumococos S muertos, los ratones morían, y en su sangre se podían aislar neumococos S vivos. Como las bacterias muertas no pudieron haberse multiplicado dentro del ratón, Griffith razonó que debía producirse algún tipo de cambio o transformación de un tipo bacteriano a otro por medio de una transferencia de alguna sustancia activa, que denominó principio transformante. Esta sustancia proporcionaba la capacidad a los neumococos R de producir una cápsula azucarada y transformarse así en virulentas. En los siguientes 15 años, estos experimentos iniciales se replicaron mezclando distintos tipos de cepas bacterianas muertas por el calor con otras vivas, tanto en ratones (in vivo) como en tubos de ensayo (in vitro).[12]​ La búsqueda del «factor transformante» que era capaz de hacer virulentas a cepas que inicialmente no lo eran continuó hasta 1944, año en el cual Oswald Avery, Colin MacLeod y Maclyn McCarty realizaron un experimento hoy clásico. Estos investigadores extrajeron la fracción activa (el factor transformante) y, mediante análisis químicos, enzimáticos y serológicos, observaron que no contenía proteínas, ni lípidos no ligados, ni polisacáridos activos, sino que estaba constituido principalmente por «una forma viscosa de ácido desoxirribonucleico altamente polimerizado», es decir, ADN. El ADN extraído de las cepas bacterianas S muertas por el calor lo mezclaron in vitro con cepas R vivas: el resultado fue que se formaron colonias bacterianas S, por lo que se concluyó inequívocamente que el factor o principio transformante era el ADN.[13]​

A pesar de que la identificación del ADN como principio transformante aún tardó varios años en ser universalmente aceptada, este descubrimiento fue decisivo en el conocimiento de la base molecular de la herencia, y constituye el nacimiento de la genética molecular. Finalmente, el papel exclusivo del ADN en la heredabilidad fue confirmado en 1952 mediante los experimentos de Alfred Hershey y Martha Chase, en los cuales comprobaron que el fago T2 transmitía su información genética en su ADN, pero no en su proteína[14]​ (véase también experimento de Hershey y Chase).

En cuanto a la caracterización química de la molécula, Chargaff realizó en 1940 algunos experimentos que le sirvieron para establecer las proporciones de las bases nitrogenadas en el ADN. Descubrió que las proporciones de purinas eran idénticas a las de pirimidinas, la «equimolecularidad» de las bases ([A]=[T], [G]=[C]) y el hecho de que la cantidad de G+C en una determinada molécula de ADN no siempre es igual a la cantidad de A+T y puede variar desde el 36 hasta el 70 por ciento del contenido total.[10]​ Con toda esta información y junto con los datos de difracción de rayos X proporcionados por Rosalind Franklin, James Watson y Francis Crick propusieron en 1953 el modelo de la hélice doble de ADN para representar la estructura tridimensional del polímero.[15]​ En una serie de cinco artículos en el mismo número de Nature se publicó la evidencia experimental que apoyaba el modelo de Watson y Crick.[16]​ De estos, el artículo de Franklin y Raymond Gosling fue la primera publicación con datos de difracción de rayos X que apoyaba el modelo de Watson y Crick,[17]​[18]​ y en ese mismo número de Nature también aparecía un artículo sobre la estructura del ADN de Maurice Wilkins y sus colaboradores.[19]​

Watson, Crick y Wilkins recibieron conjuntamente, en 1962, después de la muerte de Rosalind Franklin, el Premio Nobel en Fisiología o Medicina.[20]​ Sin embargo, el debate continúa sobre quién debería recibir crédito por el descubrimiento.[21]​

Propiedades físicas y químicas

editar
 
Estructura química del ADN: dos cadenas de nucleótidos conectadas mediante puentes de hidrógeno, que aparecen como líneas punteadas.

El ADN es un largo polímero formado por unidades repetitivas, los nucleótidos.[22]​[23]​ Una doble cadena de ADN mide de 22 a 26 ángstroms (2.2 a 2.6 nanómetros) de ancho, y una unidad (un nucleótido) mide 3.3 Å (0.33 nm) de largo.[24]​ Aunque cada unidad individual que se repite es muy pequeña, los polímeros de ADN pueden ser moléculas enormes que contienen millones de nucleótidos. Por ejemplo, el cromosoma humano más largo, el cromosoma número 1, tiene aproximadamente 220 millones de pares de bases.[25]​

En los seres vivos, el ADN no suele existir como una molécula individual, sino como una pareja de moléculas estrechamente asociadas. Las dos cadenas de ADN se enroscan sobre sí mismas formando una especie de escalera de caracol, denominada «hélice doble». El modelo de estructura en doble hélice fue propuesto en 1953 por James Watson y Francis Crick (el artículo «Molecular Structure of Nucleic Acids: A Structure for Deoxyribose Nucleic Acid» fue publicado el 25 de abril de 1953 en Nature), después de obtener una imagen de la estructura de doble hélice gracias a la refracción por rayos X hecha por Raymond Gosling.[26]​[27]​ El éxito de este modelo radicaba en su consistencia con las propiedades físicas y químicas del ADN. El estudio mostraba, además, que la complementariedad de bases podía ser relevante en su replicación, y también la importancia de la secuencia de bases como portadora de información genética.[28]​[29]​[30]​ Cada unidad que se repite, el nucleótido, contiene un segmento de la estructura de soporte (azúcar + fosfato), que mantiene la cadena unida, y una base, que interacciona con la otra cadena de ADN en la hélice. En general, una base ligada a un azúcar se denomina nucleósido y una base ligada a un azúcar y a uno o más grupos fosfatos se denomina nucleótido.

Cuando muchos nucleótidos están unidos, como ocurre en el ADN, el polímero resultante se denomina polinucleótido.[31]​

Componentes

editar

Estructura de soporte: La estructura de soporte de una hebra de ADN está formada por unidades alternas de grupos fosfato y azúcar (desoxirribosa).[32]​ El azúcar en el ADN es una pentosa, específicamente, la desoxirribosa.

 
Enlace fosfodiéster. El grupo fosfato (PO43-) une el carbono 5' del azúcar de un nucleósido con el carbono 3' del siguiente.
Su fórmula química es H3PO4. Cada nucleótido puede contener uno (monofosfato: AMP), dos (difosfato: ADP) o tres (trifosfato: ATP) grupos de ácido fosfórico, aunque como monómeros constituyentes de los ácidos nucleicos solo aparecen como nucleósidos monofosfato.
Es un monosacárido de 5 átomos de carbono (una pentosa) derivado de la ribosa, que es parte de la estructura de nucleótidos del ADN. Su fórmula química es C5H10O4. Una de las diferencias principales entre el ADN y el ARN es el azúcar, pues en el ARN la 2‑desoxirribosa del ADN es reemplazada por una pentosa alternativa, la ribosa.[30]​
Las moléculas de azúcar se unen entre sí a través de grupos fosfato, que forman enlaces fosfodiéster entre los átomos de carbono tercero (3′, «tres prima») y quinto (5′, «cinco prima») de dos anillos adyacentes de azúcar. La formación de enlace= asimétricos implica que cada hebra de ADN tiene una dirección. En una hélice doble, la dirección de los nucleótidos en una hebra (3′ → 5′) es opuesta a la dirección en la otra hebra (5′ → 3′). Esta organización de las hebras de ADN se denomina antiparalela; son cadenas paralelas, pero con direcciones opuestas. De la misma manera, los extremos asimétricos de las hebras de ADN se denominan extremo 5′ («cinco prima») y extremo 3′ («tres prima»), respectivamente.
Las cuatro bases nitrogenadas mayoritarias que se encuentran en el ADN son la adenina (A), la citosina (C), la guanina (G) y la timina (T). Cada una de estas cuatro bases está unida al armazón de azúcar-fosfato a través del azúcar para formar el nucleótido completo (base-azúcar-fosfato). Las bases son compuestos heterocíclicos y aromáticos con dos o más átomos de nitrógeno, y, dentro de las bases mayoritarias, se clasifican en dos grupos: las bases púricas o purinas (adenina y guanina), derivadas de la purina y formadas por dos anillos unidos entre sí, y las bases pirimidínicas o bases pirimídicas o pirimidinas (citosina y timina), derivadas de la pirimidina y con un solo anillo.[30]​ En los ácidos nucleicos existe una quinta base pirimidínica, denominada uracilo (U), que normalmente ocupa el lugar de la timina en el ARN y difiere de esta en que carece de un grupo metilo en su anillo. El uracilo no se encuentra habitualmente en el ADN, solo aparece raramente como un producto residual de la degradación de la citosina por procesos de desaminación oxidativa.
 
Timina: 2, 4-dioxo, 5-metilpirimidina.
En el código genético se representa con la letra T. Es un derivado pirimidínico con un grupo oxo en las posiciones 2 y 4, y un grupo metil en la posición 5. Forma el nucleósido timidina (siempre desoxitimidina, ya que solo aparece en el ADN) y el nucleótido timidilato o timidina monofosfato (dTMP). En el ADN, la timina siempre se empareja con la adenina de la cadena complementaria mediante 2 puentes de hidrógeno, T = A. Su fórmula química es C5H6N2O2 y su nomenclatura 2, 4‑dioxo, 5‑metilpirimidina.
 
Citosina: 2-oxo, 4-aminopirimidina.
En el código genético se representa con la letra C. Es un derivado pirimidínico, con un grupo amino en posición 4 y un grupo oxo en posición 2. Forma el nucleósido citidina (desoxicitidina en el ADN) y el nucleótido citidilato o (desoxi)citidina monofosfato (dCMP en el ADN, CMP en el ARN). La citosina siempre se empareja en el ADN con la guanina de la cadena complementaria mediante un enlace triple, C≡G. Su fórmula química es C4H5N3O y su nomenclatura 2‑oxo, 4 aminopirimidina. Su masa molecular es de 111.1 unidades de masa atómica. La citosina se descubrió en 1894, al aislarla del tejido del timo de carnero.
 
Adenina: 6‑aminopurina.
En el código genético se representa con la letra A. Es un derivado de la purina con un grupo amino en la posición 6. Forma el nucleósido adenosina (desoxiadenosina en el ADN) y el nucleótido adenilato o (desoxi)adenosina monofosfato (dAMP, AMP). En el ADN siempre se empareja con la timina de la cadena complementaria mediante 2 puentes de hidrógeno, A = T. Su fórmula química es C5H5N5 y su nomenclatura 6‑aminopurina. La adenina, junto con la timina, fue descubierta en 1885 por el médico alemán Albrecht Kossel.
 
Guanina: 6‑oxo, 2‑aminopurina.
En el código genético se representa con la letra G. Es un derivado púrico con un grupo oxo en la posición 6 y un grupo amino en la posición 2. Forma el nucleósido (desoxi)guanosina y el nucleótido guanilato o (desoxi)guanosina monofosfato (dGMP, GMP). La guanina siempre se empareja en el ADN con la citosina de la cadena complementaria mediante tres enlaces de hidrógeno, G≡C. Su fórmula química es C5H5N5O y su nomenclatura 6‑oxo, 2‑aminopurina.

También existen otras bases nitrogenadas (las llamadas bases nitrogenadas minoritarias), derivadas de forma natural o sintética de alguna otra base mayoritaria. Lo son por ejemplo la hipoxantina, relativamente abundante en el ARNt, o la cafeína, ambas derivadas de la adenina; otras, como el aciclovir, derivadas de la guanina, son análogos sintéticos usados en terapia antivírica; otras, como una de las derivadas del uracilo, son antitumorales.

Las bases nitrogenadas tienen una serie de características que les confieren unas propiedades determinadas. Una característica importante es su carácter aromático, consecuencia de la presencia en el anillo de dobles enlaces en posición conjugada. Ello les confiere la capacidad de absorber luz en la zona ultravioleta del espectro en torno a los 260 nm, lo cual puede aprovecharse para determinar el coeficiente de extinción del ADN y hallar la concentración existente de los ácidos nucleicos. Otra de sus características es que presentan tautomería o isomería de grupos funcionales, debido a que un átomo de hidrógeno unido a otro átomo puede migrar a una posición vecina; en las bases nitrogenadas se dan dos tipos de tautomerías: tautomería lactama-lactima, donde el hidrógeno migra del nitrógeno al oxígeno del grupo oxo (forma lactama) y viceversa (forma lactima), y tautomería imina-amina primaria, donde el hidrógeno puede estar formando el grupo amina (forma amina primaria) o migrar al nitrógeno adyacente (forma imina). La adenina solamente puede presentar tautomería amina-imina, la timina y el uracilo muestran tautomería doble lactama-lactima, y la guanina y citosina pueden presentar ambas. Por otro lado, y aunque se trate de moléculas apolares, las bases nitrogenadas presentan suficiente carácter polar como para establecer puentes de hidrógeno, ya que tienen átomos muy electronegativos (nitrógeno y oxígeno) que presentan carga parcial negativa, y átomos de hidrógeno con carga parcial positiva, de manera que se forman dipolos que permiten que se formen estos enlaces débiles.

Se estima que el genoma humano haploide tiene alrededor de 3000 millones de pares de bases. Para indicar el tamaño de las moléculas de ADN se indica el número de pares de bases, y como derivados hay dos unidades de medida muy utilizadas, la kilobase (kb), que equivale a 1000 pares de bases, y la megabase (Mb), que equivale a un millón de pares de bases.

Apareamiento de bases

editar
Véase también: Par de bases
 
Un par de bases C≡G con tres puentes de hidrógeno
 
Un par A=T con dos puentes de hidrógeno. Los puentes de hidrógeno se muestran como líneas discontinuas.

La hélice doble de ADN se mantiene estable mediante la formación de puentes de hidrógeno entre las bases asociadas a cada una de las dos hebras. Para la formación de un enlace de hidrógeno una de las bases debe presentar un «donador» de hidrógenos con un átomo de hidrógeno con carga parcial positiva (-NH2 o -NH) y la otra base debe presentar un grupo «aceptor» de hidrógenos con un átomo cargado electronegativamente (C=O o N). Los puentes de hidrógeno son uniones más débiles que los típicos enlaces químicos covalentes, como los que conectan los átomos en cada hebra de ADN, pero más fuertes que interacciones hidrófobas individuales, enlaces de Van der Waals, etc. Como los puentes de hidrógeno no son enlaces covalentes, pueden romperse y formarse de nuevo de forma relativamente sencilla. Por esta razón, las dos hebras de la doble hélice pueden separarse como una cremallera, bien por fuerza mecánica o por alta temperatura.[33]​ La doble hélice se estabiliza además por el efecto hidrofóbico y el apilamiento, que no se ven influidos por la secuencia de bases del ADN.[34]​

Cada tipo de base en una hebra forma un enlace únicamente con un tipo de base en la otra hebra, lo que se denomina complementariedad de las bases. Así, las purinas forman enlaces con las pirimidinas, de forma que A se enlaza solo con T, y C solo con G. La organización de dos nucleótidos apareados a lo largo de la doble hélice se denomina apareamiento de bases. Este emparejamiento corresponde a la observación ya realizada por Erwin Chargaff (1905‑2002),[35]​ que mostró que la cantidad de adenina era muy similar a la cantidad de timina, y que la cantidad de citosina era igual a la cantidad de guanina en el ADN. Como resultado de esta complementariedad, toda la información contenida en la secuencia de doble hebra de la hélice de ADN está duplicada en cada hebra, lo cual es fundamental durante el proceso de replicación del ADN. En efecto, esta interacción reversible y específica entre pares de bases complementarias es crítica para todas las funciones del ADN en los seres vivos.[22]​

Como se ha indicado anteriormente, los dos tipos de pares de bases forman un número diferente de enlaces de hidrógeno: A=T forman dos puentes de hidrógeno, y C≡G forman tres puentes de hidrógeno (ver imágenes). El par de bases GC es por tanto más fuerte que el par de bases AT. Como consecuencia, tanto el porcentaje de pares de bases GC como la longitud total de la doble hélice de ADN determinan la fuerza de la asociación entre las dos hebras de ADN. Las dobles hélices largas de ADN con alto contenido en GC tienen hebras que interaccionan más fuertemente que las dobles hélices cortas con alto contenido en AT.[36]​ Por esta razón, las zonas de la doble hélice de ADN que necesitan separarse fácilmente tienden a tener un alto contenido en AT, como por ejemplo la secuencia TATAAT de la caja de Pribnow de algunos promotores.[37]​ En el laboratorio, la fuerza de esta interacción puede medirse buscando la temperatura requerida para romper los puentes de hidrógeno, la temperatura de fusión (también denominado valor Tm, del inglés melting temperature). Cuando todas las pares de bases en una doble hélice se funden, las hebras se separan en solución en dos hebras completamente independientes. Estas moléculas de ADN de hebra simple no tienen una única forma común, sino que algunas conformaciones son más estables que otras.[38]​

Otros tipos de pares de bases

editar
 
Par de bases A=T de tipo Watson-Crick. En azul el «donador» de hidrógenos y en rojo el «aceptor».
 
Par de bases A=T de tipo Watson-Crick reverso. En azul el «donador» de hidrógenos y en rojo el «aceptor». Nótese que la pirimidina ha sufrido un giro de 180º sobre el eje del carbono 6.

Existen diferentes tipos de pares de bases que se pueden formar según el modo como se forman los puentes de hidrógeno. Los que se observan en la doble hélice de ADN son los llamados pares de bases Watson-Crick, pero también existen otros posibles pares de bases, como los denominados Hoogsteen y Wobble u oscilante, que pueden aparecer en circunstancias particulares. Además, para cada tipo existe a su vez el mismo par reverso, es decir, el que se da si se gira la base pirimidínica 180° sobre su eje.

  • Watson-Crick (pares de bases de la doble hélice): los grupos de la base púrica que intervienen en el enlace de hidrógeno son los que corresponden a las posiciones 1 y 6 (N aceptor y -NH2 donador si la purina es una A) y los grupos de la base pirimidínica, los que se encuentran en las posiciones 3 y 4 (-NH donador y C=O aceptor si la pirimidina es una T). En el par de bases Watson-Crick reverso participarían los grupos de las posiciones 2 y 3 de la base pirimidínica (ver imágenes).
  • Hoogsteen: en este caso cambian los grupos de la base púrica, que ofrece una cara diferente (posiciones 6 y 7) y que forman enlaces con los grupos de las pirimidinas de las posiciones 3 y 4 (como en Watson-Crick). También puede haber Hoogsteen reversos. Con este tipo de enlace pueden unirse A=U (Hoogsteen y Hoogsteen reverso) y A=C (Hoogsteen reverso).
  • Wobble u oscilante: este tipo de enlace permite que se unan guanina y timina con un enlace doble (G=T). La base púrica (G) forma enlace con los grupos de las posiciones 1 y 6 (como en Watson-Crick) y la pirimidina (T) con los grupos de las posiciones 2 y 3. Este tipo de enlace no funcionaría con A=C, ya que quedarían enfrentados los 2 «aceptores» y los 2 «donadores», y solo se podría dar en el caso inverso. Encontramos pares de bases de tipo oscilante en el ARN, durante el apareamiento de codón y anticodón. Con este tipo de enlace pueden unirse G=U (oscilante y oscilante reverso) y A=C (oscilante reverso).

En total, en su forma tautomérica mayoritaria, existen 28 posibles pares de bases nitrogenadas: 10 posibles pares de bases purina-pirimidina (2 pares Watson-Crick y 2 Watson Crick reverso, 1 par Hoogsteen y 2 pares Hoogsteen reverso, 1 par oscilante y 2 pares oscilante reverso), 7 pares homo purina-purina (A=A, G=G), 4 pares A=G y 7 pares pirimidina-pirimidina. Esto sin contar con los pares de bases que pueden formarse si también tenemos en cuenta las otras formas tautoméricas minoritarias de las bases nitrogenadas; estos, además, pueden ser responsables de mutaciones puntuales por sustitución de tipo transición.

Estructura

editar

El ADN es una molécula bicatenaria, es decir, está formada por dos cadenas dispuestas de forma antiparalela y con las bases nitrogenadas enfrentadas. En su estructura tridimensional, se distinguen distintos niveles:[39]​[40]​

Estructura primaria
Secuencia de nucleótidos encadenados. Es en estas cadenas donde se encuentra la información genética, y dado que el esqueleto es el mismo para todos, la diferencia de la información radica en la distinta secuencia de bases nitrogenadas. Esta secuencia presenta un código, que determina una información u otra, según el orden de las bases.
Estructura secundaria
Es una estructura en doble hélice. Permite explicar el almacenamiento de la información genética y el mecanismo de duplicación del ADN. Fue postulada por Watson y Crick, basándose en la difracción de rayos X que habían realizado Franklin y Wilkins, y en la equivalencia de bases de Chargaff, según la cual la suma de adeninas más guaninas es igual a la suma de timinas más citosinas.
Es una cadena doble, dextrógira o levógira, según el tipo de ADN. Ambas cadenas son complementarias, pues la adenina y la guanina de una cadena se unen, respectivamente, a la timina y la citosina de la otra. Ambas cadenas son antiparalelas, pues el extremo 3´ de una se enfrenta al extremo 5' de la homóloga.
Existen tres modelos de ADN. El ADN de tipo B es el más abundante y es el que tiene la estructura descrita por Watson y Crick.
Estructura terciaria
Se refiere a cómo se almacena el ADN en un espacio reducido, para formar los nucleosomas.[41]​ Varía según se trate de seres procariotas o eucariotas:
  1. En procariotas el ADN se pliega como una súperhélice, generalmente en forma circular y asociada a una pequeña cantidad de proteínas. Lo mismo ocurre en orgánulos celulares como las mitocondrias y en los cloroplastos.
  2. En eucariotas, dado que la cantidad de ADN de cada cromosoma es muy grande, el empaquetamiento ha de ser más complejo y compacto; para ello se necesita la presencia de proteínas, como las histonas y otras proteínas de naturaleza no histónica (en los espermatozoides estas proteínas son las protaminas).[39]​
Estructura cuaternaria
La cromatina presente en el núcleo tiene un grosor de 300 Å, pues la fibra de cromatina de 100 Å se enrolla formando una fibra de cromatina de 300 Å. El enrollamiento de los nucleosomas recibe el nombre de solenoide. Dichos solenoides se enrollan formando la cromatina del núcleo interfásico de la célula eucariota. Cuando la célula entra en división, el ADN se compacta más, formando así los cromosomas.

Estructuras en hélice doble

editar
 
De izquierda a derecha, las estructuras de ADN A, B y Z.
Artículos principales: ADN-B, ADN-A y ADN-Z.

El ADN existe en muchas conformaciones.[32]​ Sin embargo, en organismos vivos solo se han observado las conformaciones ADN-A, ADN-B y ADN-Z. La conformación que adopta el ADN depende de su secuencia, la cantidad y dirección de superenrollamiento que presenta, la presencia de modificaciones químicas en las bases y las condiciones de la solución, tales como la concentración de iones de metales y poliaminas.[42]​ De las tres conformaciones, la forma «B» es la más común en las condiciones existentes en las células.[43]​ Las dos dobles hélices alternativas del ADN difieren en su geometría y dimensiones.

La forma «A» es una espiral que gira hacia la derecha, más amplia que la «B», con una hendidura menor superficial y más amplia, y una hendidura mayor más estrecha y profunda. La forma «A» ocurre en condiciones no fisiológicas en formas deshidratadas de ADN, mientras que en la célula puede producirse en apareamientos híbridos de hebras ADN‑ARN, además de en complejos enzima-ADN.[44]​[45]​

Los segmentos de ADN en los que las bases han sido modificadas por metilación pueden sufrir cambios conformacionales mayores y adoptar la forma «Z». En este caso, las hebras giran alrededor del eje de la hélice en una espiral que gira a mano izquierda, lo opuesto a la forma «B» más frecuente.[46]​ Estas estructuras poco frecuentes pueden ser reconocidas por proteínas específicas que se unen a ADN‑Z y posiblemente estén implicadas en la regulación de la transcripción.[47]​

Estructuras en cuádruplex

editar
 
Estructura de un ADN en cuádruplex formada por repeticiones en los telómeros. La conformación de la estructura de soporte del ADN difiere significativamente de la típica estructura en hélice.[48]​

En los extremos de los cromosomas lineales existen regiones especializadas de ADN denominadas telómeros. La función principal de estas regiones es permitir a la célula replicar los extremos cromosómicos utilizando la enzima telomerasa, puesto que las enzimas que replican el resto del ADN no pueden copiar los extremos 3' de los cromosomas.[49]​ Estas terminaciones cromosómicas especializadas también protegen los extremos del ADN, y evitan que los sistemas de reparación del ADN en la célula los procesen como ADN dañado que debe ser corregido.[50]​ En las células humanas, los telómeros son largas zonas de ADN de hebra sencilla que contienen algunos miles de repeticiones de una única secuencia TTAGGG.[51]​

Estas secuencias ricas en guanina pueden estabilizar los extremos cromosómicos mediante la formación de estructuras de juegos apilados de unidades de cuatro bases, en lugar de los pares de bases encontrados normalmente en otras estructuras de ADN. En este caso, cuatro bases guanina forman unidades con superficie plana que se apilan una sobre otra, para formar una estructura cuádruple-G estable.[52]​ Estas estructuras se estabilizan formando puentes de hidrógeno entre los extremos de las bases y la quelatación de un metal iónico en el centro de cada unidad de cuatro bases.[53]​ También se pueden formar otras estructuras, con el juego central de cuatro bases procedente, o bien de una hebra sencilla plegada alrededor de las bases, o bien de varias hebras paralelas diferentes, de forma que cada una contribuye con una base a la estructura central.

Además de estas estructuras apiladas, los telómeros también forman largas estructuras en lazo, denominadas lazos teloméricos o lazos‑T (T‑loops en inglés). En este caso, las hebras simples de ADN se enroscan sobre sí mismas en un amplio círculo estabilizado por proteínas que se unen a telómeros.[54]​ En el extremo del lazo T, el ADN telomérico de hebra sencilla se sujeta a una región de ADN de doble hebra porque la hebra de ADN telomérico altera la doble hélice y se aparea a una de las dos hebras. Esta estructura de triple hebra se denomina lazo de desplazamiento o lazo D (D‑loop).[52]​

Hendiduras mayor y menor

editar
 
Animación de la estructura de una sección de ADN. Las bases se encuentran horizontalmente entre las dos hebras en espiral. Versión ampliada[55]​
 
Doble hélice: a) Dextrógira, b) Levógira.

La hélice doble es una espiral dextrógira, esto es, cada una de las cadenas de nucleótidos gira a la derecha; esto puede verificarse si nos fijamos, yendo de abajo arriba, en la dirección que siguen los segmentos de las hebras que quedan en primer plano. Si las dos hebras giran a derechas se dice que la doble hélice es dextrógira, y si giran a izquierdas, levógira (esta forma puede aparecer en hélices alternativas debido a cambios conformacionales en el ADN). Pero en la conformación más común que adopta el ADN, la doble hélice es dextrógira, girando cada par de bases respecto al anterior unos 36º.[56]​

Cuando las dos hebras de ADN se enrollan una sobre la otra (sea a derechas o a izquierdas), se forman huecos o hendiduras entre una hebra y la otra, dejando expuestos los laterales de las bases nitrogenadas del interior (ver la animación). En la conformación más común que adopta el ADN aparecen, como consecuencia de los ángulos formados entre los azúcares de ambas cadenas de cada par de bases nitrogenadas, dos tipos de hendiduras alrededor de la superficie de la doble hélice: una de ellas, la hendidura o surco mayor, que mide 22 Å (2.2 nm) de ancho, y la otra, la hendidura o surco menor, que mide 12 Å (1.2 nm) de ancho.[57]​ Cada vuelta de hélice, que es cuando esta ha realizado un giro de 360° o lo que es lo mismo, de principio de hendidura mayor a final de hendidura menor, medirá por tanto 34 Å, y en cada una de esas vueltas hay unos 10.5 pb.

 
Hendiduras mayor y menor de la doble hélice

La anchura de la hendidura mayor implica que los extremos de las bases son más accesibles en esta, de forma que la cantidad de grupos químicos expuestos también es mayor lo cual facilita la diferenciación entre los pares de bases A‑T, T‑A, C‑G, G‑C. Como consecuencia de ello, también se verá facilitado el reconocimiento de secuencias de ADN por parte de diferentes proteínas sin la necesidad de abrir la doble hélice. Así, proteínas como los factores de transcripción que pueden unirse a secuencias específicas, frecuentemente contactan con los laterales de las bases expuestos en la hendidura mayor.[58]​ Por el contrario, los grupos químicos que quedan expuestos en la hendidura menor son similares, de forma que el reconocimiento de los pares de bases es más difícil; por ello se dice que la hendidura mayor contiene más información que la hendidura menor.[56]​

Sentido y antisentido

editar
Artículo principal: Antisentido

Una secuencia de ADN se denomina «sentido» si su secuencia es la misma que la secuencia de un ARN mensajero que se traduce en una proteína. La secuencia de la hebra de ADN complementaria se denomina «antisentido» (antisense). En ambas hebras de ADN de la doble hélice pueden existir tanto secuencias «sentido», que codifican ARNm, como «antisentido», que no lo codifican. Es decir, las secuencias que codifican ARNm no están todas presentes en una sola de las hebras, sino repartidas entre las dos hebras. Tanto en procariotas como en eucariotas se producen ARN con secuencias antisentido, pero la función de esos ARN no está completamente clara.[59]​ Se ha propuesto que los ARN antisentido están implicados en la regulación de la expresión génica mediante apareamiento ARN‑ARN: los ARN antisentido se aparearían con los ARNm complementarios, bloqueando de esta forma su traducción.[60]​

En unas pocas secuencias de ADN en procariotas y eucariotas —este hecho es más frecuente en plásmidos y virus—, la distinción entre hebras sentido y antisentido es más difusa, debido a que presentan genes superpuestos.[61]​ En estos casos, algunas secuencias de ADN tienen una función doble, codificando una proteína cuando se lee a lo largo de una hebra, y una segunda proteína cuando se lee en la dirección contraria a lo largo de la otra hebra. En bacterias, esta superposición puede estar involucrada en la regulación de la transcripción del gen,[62]​ mientras que en virus los genes superpuestos aumentan la cantidad de información que puede codificarse en sus diminutos genomas.[63]​

Superenrollamiento

editar
 
Estructura de moléculas de ADN lineales con los extremos fijos y superenrolladas. Por claridad, se ha omitido la estructura en hélice del ADN.

El ADN puede retorcerse como una cuerda en un proceso denominado: superenrollamiento de ADN. Cuando el ADN está en un estado «relajado», una hebra normalmente gira alrededor del eje de la doble hélice una vez cada 10.4 pares de bases, pero si el ADN está retorcido las hebras pueden estar unidas más estrechamente o más relajadamente.[64]​ Si el ADN está retorcido en la dirección de la hélice, se dice que el superenrollamiento es positivo, y las bases se mantienen juntas de forma más estrecha. Si el ADN se retuerce en la dirección opuesta, el superenrollamiento se llama negativo, y las bases se alejan. En la naturaleza, la mayor parte del ADN tiene un ligero superenrollamiento negativo que es producido por enzimas denominadas topoisomerasas.[65]​ Estas enzimas también son necesarias para liberar las fuerzas de torsión introducidas en las hebras de ADN durante procesos como la transcripción y la replicación.[66]​

Modificaciones químicas

editar
     
citosina 5‑metil‑citosina timina
Estructura de la citosina con y sin el grupo metilo. Tras la desaminación, la 5‑metil‑citosina tiene la misma estructura que la timina.

Modificaciones de bases del ADN

editar
Véase también: Metilación

La expresión de los genes está influenciada por la forma en la que el ADN está empaquetado en cromosomas, en una estructura denominada cromatina. Las modificaciones de bases pueden estar implicadas en el empaquetamiento del ADN: las regiones que presentan una expresión génica baja o nula normalmente contienen niveles altos de metilación de las bases citosina. Por ejemplo, la metilación de citosina produce 5‑metil‑citosina, que es importante para la inactivación del cromosoma X.[67]​ El nivel medio de metilación varía entre organismos: el gusano Caenorhabditis elegans carece de metilación de citosina, mientras que los vertebrados presentan un nivel alto —hasta 1 %— de su ADN contiene 5‑metil‑citosina.[68]​ A pesar de la importancia de la 5‑metil‑citosina, esta puede desaminarse para generar una base timina. Las citosinas metiladas son por tanto particularmente sensibles a mutaciones.[69]​ Otras modificaciones de bases incluyen la metilación de adenina en bacterias y la glicosilación de uracilo para producir la «base‑J» en kinetoplastos.[70]​[71]​

Daño del ADN

editar
Véase también: Mutación
 
Molécula de benzopireno, mutágeno presente por ejemplo en el humo del tabaco, ligada a una hélice de ADN.[72]​

El ADN puede resultar dañado por muchos tipos de mutágenos, que cambian la secuencia del ADN: agentes alquilantes, además de radiación electromagnética de alta energía, como luz ultravioleta y rayos X. El tipo de daño producido en el ADN depende del tipo de mutágeno. Por ejemplo, la luz UV puede dañar al ADN produciendo dímeros de timina, que se forman por ligamiento cruzado entre bases pirimidínicas.[73]​ Por otro lado, oxidantes tales como radicales libres o el peróxido de hidrógeno producen múltiples daños, incluyendo modificaciones de bases, sobre todo guanina, y roturas de doble hebra (double‑strand breaks).[74]​ En una célula humana cualquiera, alrededor de 500 bases sufren daño oxidativo cada día.[75]​[76]​ De estas lesiones oxidativas, las más peligrosas son las roturas de doble hebra, ya que son difíciles de reparar y pueden producir mutaciones puntuales, inserciones y deleciones de la secuencia de ADN, así como translocaciones cromosómicas.[77]​

Muchos mutágenos se posicionan entre dos pares de bases adyacentes, por lo que se denominan agentes intercalantes. La mayoría de los agentes intercalantes son moléculas aromáticas y planas, como el bromuro de etidio, la daunomicina, la doxorubicina y la talidomida. Para que un agente intercalante pueda integrarse entre dos pares de bases, estas deben separarse, distorsionando las hebras de ADN y abriendo la doble hélice. Esto inhibe la transcripción y la replicación del ADN, causando toxicidad y mutaciones. Por ello, los agentes intercalantes del ADN son a menudo carcinógenos: el benzopireno, las acridinas, la aflatoxina y el bromuro de etidio son ejemplos bien conocidos.[78]​[79]​[80]​ Sin embargo, debido a su capacidad para inhibir la replicación y la transcripción del ADN, estas toxinas también se utilizan en quimioterapia para inhibir el rápido crecimiento de las células cancerosas.[81]​

El daño en el ADN inicia una respuesta que activa diferentes mecanismos de reparación que reconocen lesiones específicas en el ADN, que son reparadas en el momento para recuperar la secuencia original del ADN. Asimismo, el daño en el ADN provoca una parada en el ciclo celular, que conlleva la alteración de numerosos procesos fisiológicos, que a su vez implica síntesis, transporte y degradación de proteínas (véase también Checkpoint de daños en el ADN). Alternativamente, si el daño genómico es demasiado grande para que pueda ser reparado, los mecanismos de control inducirán la activación de una serie de rutas celulares que culminarán en la muerte celular.

Funciones biológicas

editar

Las funciones biológicas del ADN incluyen el almacenamiento de información (genes y genoma), la codificación de proteínas (transcripción y traducción) y su autoduplicación (replicación del ADN) para asegurar la transmisión de la información a las células hijas durante la división celular.

Genes y genoma

editar
Véanse también: Núcleo celular, Cromatina, Cromosoma y Genoma.

El ADN se puede considerar como un almacén cuyo contenido es la información (mensaje) necesaria para construir y sostener el organismo en el que reside, la cual se transmite de generación en generación. El conjunto de información que cumple esta función en un organismo dado se denomina genoma, y el ADN que lo constituye, ADN genómico.

El ADN genómico (que se organiza en moléculas de cromatina que a su vez se ensamblan en cromosomas) se encuentra en el núcleo celular de los eucariotas, además de pequeñas cantidades en las mitocondrias y cloroplastos. En procariotas, el ADN se encuentra en un cuerpo de forma irregular denominado nucleoide.[82]​

ADN codificante

editar
 
ARN polimerasa T7 (azul) produciendo un ARNm (verde) a partir de un molde de ADN (naranja).[83]​
Véase también: Gen

La información de un genoma está contenida en los genes, y al conjunto de toda la información que corresponde a un organismo se le denomina su genotipo. Un gen es una unidad de herencia y es una región de ADN que influye en una característica particular de un organismo (como el color de los ojos, por ejemplo). Los genes contienen un marco de lectura abierto que puede transcribirse, además de secuencias reguladoras, tales como promotores y enhancers, que controlan la transcripción del marco de lectura abierto.

Desde este punto de vista, las «obreras» de este mecanismo son las proteínas. Estas pueden ser «estructurales», como las proteínas de los músculos, cartílagos, pelo, etc., o «funcionales», como la hemoglobina o las innumerables enzimas del organismo. La función principal de la herencia es la especificación de las proteínas, siendo el ADN una especie de «plano» o «receta» para producirlas. La mayor parte de las veces la modificación del ADN provocará una disfunción proteica que dará lugar a la aparición de alguna enfermedad. Pero en determinadas ocasiones, las modificaciones podrán provocar cambios beneficiosos que darán lugar a individuos mejor adaptados a su entorno.

Las aproximadamente treinta mil proteínas diferentes en el cuerpo humano están constituidas por veinte aminoácidos diferentes, y una molécula de ADN debe especificar la secuencia en que se unen dichos aminoácidos.

En el proceso de elaborar una proteína, el ADN de un gen se lee y se transcribe a ARN. Este ARN sirve como mensajero entre el ADN y la maquinaria que elaborará las proteínas y por eso recibe el nombre de ARN mensajero o ARNm. El ARN mensajero sirve de molde a la maquinaria que elabora las proteínas, para que ensamble los aminoácidos en el orden preciso para armar la proteína.

El dogma central de la biología molecular establecía que el flujo de actividad y de información era: ADN → ARN → proteína. No obstante, en la actualidad ha quedado demostrado que este «dogma» debe ser ampliado, pues se han encontrado otros flujos de información: en algunos organismos (virus de ARN) la información fluye de ARN a ADN; este proceso se conoce como «transcripción inversa o reversa», también llamada «retrotranscripción». Además, se sabe que existen secuencias de ADN que se transcriben a ARN y son funcionales como tales, sin llegar a traducirse nunca a proteína: son los ARN no codificantes, como es el caso de los ARN interferentes.[39]​[40]​

ADN no codificante

editar

El ADN del genoma de un ser vivo puede dividirse conceptualmente en dos: el que codifica las proteínas (los genes) y el que no codifica. En muchas especies, solo una pequeña fracción del genoma codifica proteínas. Por ejemplo, solo alrededor del 1.5 % del genoma humano consiste en exones que codifican proteínas (20 000 a 25 000 genes), mientras que más del 90 % consiste en ADN no codificante.[84]​

El ADN no codificante (también denominado ADN basura) corresponde a secuencias del genoma que no generan una proteína (procedentes de transposiciones, duplicaciones, translocaciones y recombinaciones de virus, etc.), incluyendo los intrones. Hasta hace poco tiempo se pensaba que el ADN no codificante no tenía utilidad alguna, pero estudios recientes indican que eso es inexacto. Entre otras funciones, se postula que el llamado «ADN basura» regula la expresión diferencial de los genes.[85]​ Por ejemplo, algunas secuencias tienen afinidad hacia proteínas especiales que tienen la capacidad de unirse al ADN (como los homeodominios, los complejos receptores de hormonas esteroides, etc.), con un papel importante en el control de los mecanismos de trascripción y replicación. Estas secuencias se llaman frecuentemente «secuencias reguladoras», y los investigadores suponen que solo se ha identificado una pequeña fracción de las que realmente existen. La presencia de tanto ADN no codificante en genomas eucarióticos y las diferencias en tamaño del genoma entre especies representan un misterio que es conocido como el «enigma del valor de C».[86]​ Los elementos repetitivos también son elementos funcionales. Si no se considerasen así, se excluiría más del 50 % de los nucleótidos totales, ya que constituyen elementos de repetición.

Recientemente, un grupo de investigadores de la Universidad de Yale ha descubierto una secuencia de ADN no codificante que sería la responsable de que los seres humanos hayan desarrollado la capacidad de agarrar y/o manipular objetos o herramientas.[87]​

Por otro lado, algunas secuencias de ADN desempeñan un papel estructural en los cromosomas: los telómeros y centrómeros contienen pocos o ningún gen codificante de proteínas, pero son importantes para estabilizar la estructura de los cromosomas. Algunos genes no codifican proteínas, pero sí se transcriben en ARN: ARN ribosómico, ARN de transferencia y ARN de interferencia (ARNi, que son ARN que bloquean la expresión de genes específicos). La estructura de intrones y exones de algunos genes (como los de inmunoglobulinas y protocadherinas) son importantes por permitir los cortes y empalmes alternativos del pre‑ARN mensajero que hacen posible la síntesis de diferentes proteínas a partir de un mismo gen (sin esta capacidad no existiría el sistema inmune, por ejemplo). Algunas secuencias de ADN no codificante representan pseudogenes que tienen valor evolutivo, ya que permiten la creación de nuevos genes con nuevas funciones.[40]​ Otros ADN no codificantes proceden de la duplicación de pequeñas regiones del ADN; esto tiene mucha utilidad, ya que el rastreo de estas secuencias repetitivas permite estudios de filogenia.

Transcripción y traducción

editar
Artículos principales: Transcripción (genética) y Traducción (genética).

En un gen, la secuencia de nucleótidos a lo largo de una hebra de ADN se transcribe a un ARN mensajero (ARNm) y esta secuencia a su vez se traduce a una proteína que un organismo es capaz de sintetizar o «expresar» en uno o varios momentos de su vida, usando la información de dicha secuencia.

La relación entre la secuencia de nucleótidos y la secuencia de aminoácidos de la proteína viene determinada por el código genético, que se utiliza durante el proceso de traducción o síntesis de proteínas. La unidad codificadora del código genético es un grupo de tres nucleótidos (triplete), representado por las tres letras iniciales de las bases nitrogenadas (por ej., ACT, CAG, TTT). Los tripletes del ADN se transcriben en sus bases complementarias en el ARN mensajero, y en este caso los tripletes se denominan codones (para el ejemplo anterior, UGA, GUC, AAA). En el ribosoma cada codón del ARN mensajero interacciona con una molécula de ARN de transferencia (ARNt) que contenga el triplete complementario, denominado anticodón. Cada ARNt porta el aminoácido correspondiente al codón de acuerdo con el código genético, de modo que el ribosoma va uniendo los aminoácidos para formar una nueva proteína de acuerdo con las «instrucciones» de la secuencia del ARNm. Existen 64 codones posibles, por lo cual corresponde más de uno para cada aminoácido (por esta duplicidad de codones se dice que el código genético es un código degenerado: no es unívoco); algunos codones indican la terminación de la síntesis, el fin de la secuencia codificante; estos «codones de terminación» o «codones de parada» son UAA, UGA y UAG.[39]​

Replicación del ADN

editar
 
Esquema representativo de la replicación del ADN.
Artículo principal: Replicación de ADN

La replicación del ADN es el proceso por el cual se obtienen copias o réplicas idénticas de una molécula de ADN. La replicación es fundamental para la transferencia de la información genética de una generación a la siguiente y, por ende, es la base de la herencia. El mecanismo consiste esencialmente en la separación de las dos hebras de la doble hélice, las cuales sirven de molde para la posterior síntesis de cadenas complementarias a cada una de ellas, que llevará por nombre ARNm. El resultado final son dos moléculas idénticas a la original. Este tipo de replicación se denomina «semiconservativa» debido a que cada una de las dos moléculas resultantes de la duplicación presenta una cadena procedente de la molécula «madre» y otra recién sintetizada.

Hipótesis sobre la duplicación del ADN

editar

En un principio, se propusieron tres hipótesis:

  • Semiconservativa: Según el experimento de Meselson-Stahl, cada hebra sirve de molde para que se forme una hebra nueva, mediante la complementariedad de bases, quedando al final dos dobles hélices formadas por una hebra antigua (molde) y una nueva hebra (copia).
  • Conservativa: Tras la duplicación quedarían las dos hebras antiguas juntas y, por otro lado, las dos hebras nuevas formando una doble hélice.
  • Dispersiva: Según esta hipótesis, las hebras resultantes estarían formadas por fragmentos en doble hélice ADN antiguo y ADN recién sintetizado.

Interacciones ADN-proteína

editar

Todas las funciones del ADN dependen de sus interacciones con proteínas. Estas interacciones pueden ser inespecíficas, o bien la proteína puede unirse de forma específica a una única secuencia de ADN. También pueden unirse enzimas, entre las cuales son particularmente importantes las polimerasas, que copian las secuencia de bases del ADN durante la transcripción y la replicación.

Proteínas que unen ADN

editar

Interacciones inespecíficas

editar
 
Interacción de ADN con histonas (en blanco, arriba). Los aminoácidos básicos de estas proteínas (abajo a la izquierda, en azul) se unen a los grupos ácidos de los fosfatos del ADN (abajo a la derecha, en rojo).

Las proteínas estructurales que se unen al ADN son ejemplos bien conocidos de interacciones inespecíficas ADN-proteínas. En los cromosomas, el ADN se encuentra formando complejos con proteínas estructurales. Estas proteínas organizan el ADN en una estructura compacta denominada cromatina. En eucariotas esta estructura implica la unión del ADN a un complejo formado por pequeñas proteínas básicas denominadas histonas, mientras que en procariotas están involucradas una gran variedad de proteínas.[88]​[89]​ Las histonas forman un complejo de forma cilíndrica denominado nucleosoma, en torno al cual se enrollan casi dos vueltas de ADN de doble hélice. Estas interacciones inespecíficas quedan determinadas por la existencia de residuos básicos en las histonas, que forman enlaces iónicos con el esqueleto de azúcar-fosfato del ADN y, por tanto, son en gran parte independientes de la secuencia de bases.[90]​ Estos aminoácidos básicos experimentan modificaciones químicas de metilación, fosforilación y acetilación,[91]​ que alteran la fuerza de la interacción entre el ADN y las histonas, haciendo al ADN más o menos accesible a los factores de transcripción y por tanto modificando la tasa de transcripción.[92]​

Otras proteínas que se unen a ADN de manera inespecífica en la cromatina incluyen las proteínas del grupo de alta movilidad (HMG, High Mobility Group) que se unen a ADN plegado o distorsionado.[93]​ Estas proteínas son importantes durante el plegamiento de los nucleosomas, organizándolos en estructuras más complejas para constituir los cromosomas[94]​ durante el proceso de condensación cromosómica. Se ha propuesto que en este proceso también intervendrían otras proteínas, formando una especie de «andamio» sobre el cual se organiza la cromatina; los componentes principales de esta estructura serían: la enzima topoisomerasa II α (topoIIalpha) y la condensina 13S.[95]​ Sin embargo, el papel estructural de la topoIIalpha en la organización de los cromosomas aún es discutido, ya que otros grupos argumentan que esta enzima se intercambia rápidamente tanto en los brazos cromosómicos como en los cinetocoros durante la mitosis.[96]​

Interacciones específicas

editar

Un grupo bien definido de proteínas que unen ADN es el conformado por las proteínas que se unen específicamente a ADN monocatenario o ADN de hebra sencilla (ssDNA). En humanos, la proteína A de replicación es la mejor conocida de su familia y actúa en procesos en los que la doble hélice se separa, como la replicación del ADN, la recombinación o la reparación del ADN.[97]​ Estas proteínas parecen estabilizar el ADN monocatenario, protegiéndolo para evitar que forme estructuras de tallo-lazo (stem-loop) o que sea degradado por nucleasas.

 
El factor de transcripción represor del fago lambda unido a su ADN diana mediante un motivo hélice-giro-hélice (helix-turn-helix).[98]​

Sin embargo, otras proteínas han evolucionado para unirse específicamente a secuencias particulares de ADN. La especificidad de la interacción de las proteínas con el ADN procede de los múltiples contactos con las bases de ADN, lo que les permite «leer» la secuencia del ADN. La mayoría de esas interacciones con las bases ocurre en la hendidura mayor, donde las bases son más accesibles.[99]​

Las proteínas específicas estudiadas con mayor detalle son las encargadas de regular la transcripción, denominadas por ello factores de transcripción. Cada factor de transcripción se une a una secuencia concreta de ADN y activa o inhibe la transcripción de los genes que presentan estas secuencias próximas a sus promotores. Los factores de transcripción pueden efectuar esto de dos formas:

  • En primer lugar, pueden unirse a la polimerasa de ARN responsable de la transcripción, bien directamente o a través de otras proteínas mediadoras. De esta forma. se estabiliza la unión entre la ARN polimerasa y el promotor, lo que permite el inicio de la transcripción.[100]​
  • En segundo lugar, los factores de transcripción pueden unirse a enzimas que modifican las histonas del promotor, lo que altera la accesibilidad del molde de ADN a la ARN polimerasa.[101]​

Como los ADN diana pueden encontrarse por todo el genoma del organismo, los cambios en la actividad de un tipo de factor de transcripción pueden afectar a miles de genes.[102]​ En consecuencia, estas proteínas son frecuentemente las dianas de los procesos de transducción de señales que controlan las respuestas a cambios ambientales o diferenciación y desarrollo celular.

 
La enzima de restricción EcoRV (verde) formando un complejo con su ADN diana.[103]​

Enzimas que modifican el ADN

editar

Nucleasas y ligasas

editar

Las nucleasas son enzimas que cortan las hebras de ADN mediante la catálisis de la hidrólisis de los enlaces fosfodiéster. Las nucleasas que hidrolizan nucleótidos a partir de los extremos de las hebras de ADN se denominan exonucleasas, mientras que las endonucleasas cortan en el interior de las hebras. Las nucleasas que se utilizan con mayor frecuencia en biología molecular son las enzimas de restricción, endonucleasas que cortan el ADN por determinadas secuencias específicas. Por ejemplo, la enzima EcoRV, que se muestra a la izquierda, reconoce la secuencia de 6 bases 5′‑GAT|ATC‑3′, y hace un corte en ambas hebras en la línea vertical indicada, generando dos moléculas de ADN con los extremos romos. Otras enzimas de restricción generan, sin embargo, extremos cohesivos, ya que cortan de forma diferente las dos hebras de ADN. En la naturaleza, estas enzimas protegen a las bacterias contra las infecciones de fagos, al digerir el ADN de dicho fago cuando entra a través de la pared bacteriana, actuando como un mecanismo de defensa.[104]​ En biotecnología, estas nucleasas específicas de la secuencias de ADN se utilizan en ingeniería genética para clonar fragmentos de ADN y en la técnica de huella genética.

Las enzimas denominadas ADN ligasas pueden reunir hebras de ADN cortadas o rotas.[105]​ Las ligasas son particularmente importantes en la replicación de la hebra que sufre replicación discontinua en el ADN, ya que unen los fragmentos cortos de ADN generados en la horquilla de replicación para formar una copia completa del molde de ADN. También se utilizan en la reparación del ADN y en procesos de recombinación genética.[105]​

Topoisomerasas y helicasas

editar

Las topoisomerasas son enzimas que poseen a la vez actividad nucleasa y ligasa. Estas proteínas varían la cantidad de ADN superenrollado. Algunas de estas enzimas funcionan cortando la hélice de ADN y permitiendo que una sección rote, de manera que reducen el grado de superenrollamiento. Una vez hecho esto, la enzima vuelve a unir los fragmentos de ADN.[65]​ Otros tipos de enzimas son capaces de cortar una hélice de ADN y luego pasar la segunda hebra de ADN a través de la rotura, antes de reunir las hélices.[106]​ Las topoisomerasas son necesarias para muchos procesos en los que interviene el ADN, como la replicación del ADN y la transcripción.[66]​

Las helicasas son unas proteínas que pertenecen al grupo de los motores moleculares. Utilizan energía química almacenada en los nucleósidos trifosfatos, fundamentalmente ATP, para romper puentes de hidrógeno entre bases y separar la hélice doble de ADN en hebras simples.[107]​ Estas enzimas son esenciales para la mayoría de los procesos en los que las enzimas necesitan acceder a las bases del ADN.

Polimerasas

editar

Las polimerasas son enzimas que sintetizan cadenas de nucleótidos a partir de nucleósidos trifosfatos. La secuencia de sus productos son copias de cadenas de polinucleótidos existentes, que se denominan moldes. Estas enzimas funcionan añadiendo nucleótidos al grupo hidroxilo en 3' del nucleótido previo en una hebra de ADN. En consecuencia, todas las polimerasas funcionan en dirección 5′ → 3′.[108]​ En los sitios activos de estas enzimas, el nucleósido trifosfato que se incorpora aparea su base con la correspondiente en el molde: esto permite que la polimerasa sintentice de forma precisa la hebra complementaria al molde.

Las polimerasas se clasifican de acuerdo al tipo de molde que utilizan:

  • En la replicación del ADN, una ADN polimerasa dependiente de ADN realiza una copia de ADN a partir de una secuencia de ADN. La precisión es vital en este proceso, por lo que muchas de estas polimerasas tienen una actividad de verificación de la lectura (proofreading). Mediante esta actividad, la polimerasa reconoce errores ocasionales en la reacción de síntesis, debido a la falta de apareamiento entre el nucleótido erróneo y el molde, lo que genera un desacoplamiento (mismatch). Si se detecta un desacoplamiento, se activa una actividad exonucleasa en dirección 3′ → 5′ y la base incorrecta se elimina.[109]​ En la mayoría de los seres vivos las ADN polimerasas funcionan en un gran complejo denominado replisoma, que contiene múltiples unidades accesorias, como helicasas.[110]​
  • Las ADN polimerasas dependientes de ARN son una clase especializada de polimerasas que copian la secuencia de una hebra de ARN en ADN. Incluyen la transcriptasa inversa, que es una enzima viral implicada en la infección de células por retrovirus, y la telomerasa, que es necesaria para la replicación de los telómeros.[111]​[49]​ La telomerasa es una polimerasa inusual, porque contiene su propio molde de ARN como parte de su estructura.[50]​
  • La transcripción se lleva a cabo por una ARN polimerasa dependiente de ADN que copia la secuencia de una de las hebras de ADN en ARN. Para empezar a transcribir un gen, la ARN polimerasa se une a una secuencia del ADN denominada promotor, y separa las hebras del ADN. Entonces copia la secuencia del gen en un transcrito de ARN mensajero hasta que alcanza una región de ADN denominada terminador, donde se detiene y se separa del ADN. Como ocurre con las ADN polimerasas dependientes de ADN en humanos, la ARN polimerasa II (la enzima que transcribe la mayoría de los genes del genoma humano) funciona como un gran complejo multiproteico que contiene múltiples subunidades reguladoras y accesorias.[112]​

Recombinación genética

editar
 
 
Estructura de un intermedio en unión de Holliday en la recombinación genética. Las cuatro hebras de ADN separadas están coloreadas en rojo, azul, verde y amarillo.[113]​
Artículo principal: Recombinación genética
 
La recombinación implica la rotura y reunión de dos cromosomas homólogos (M y F) para producir dos cromosomas nuevos reorganizados (C1 y C2).

Una hélice de ADN normalmente no interacciona con otros segmentos de ADN, y en las células humanas los diferentes cromosomas incluso ocupan áreas separadas en el núcleo celular denominadas «territorios cromosómicos».[114]​ La separación física de los diferentes cromosomas es importante para que el ADN mantenga su capacidad de funcionar como un almacén estable de información. Uno de los pocos momentos en los que los cromosomas interaccionan es durante el sobrecruzamiento cromosómico (chromosomal crossover), durante el cual se recombinan. El sobrecruzamiento cromosómico ocurre cuando dos hélices de ADN se rompen, se intercambian y se unen de nuevo.

La recombinación permite a los cromosomas intercambiar información genética y produce nuevas combinaciones de genes, lo que aumenta la eficiencia de la selección natural y puede ser importante en la evolución rápida de nuevas proteínas.[115]​ Durante la profase I de la meiosis, una vez que los cromosomas homólogos están perfectamente apareados formando estructuras llamadas bivalentes, se produce el fenómeno de sobrecruzamiento o entrecruzamiento (crossing-over), en el cual las cromátidas homólogas no hermanas (procedentes del padre y de la madre) intercambian material genético. La recombinación genética resultante hace aumentar en gran medida la variación genética entre la descendencia de progenitores que se reproducen por vía sexual. La recombinación genética también puede estar implicada en la reparación del ADN, en particular en la respuesta celular a las roturas de doble hebra (double-strand breaks).[116]​

La forma más frecuente de sobrecruzamiento cromosómico es la recombinación homóloga, en la que los dos cromosomas implicados comparten secuencias muy similares. La recombinación no-homóloga puede ser dañina para las células, ya que puede producir translocaciones cromosómicas y anomalías genéticas. La reacción de recombinación está catalizada por enzimas conocidas como recombinasas, tales como RAD51.[117]​ El primer paso en el proceso de recombinación es una rotura de doble hebra, causada bien por una endonucleasa o por daño en el ADN.[118]​ Posteriormente, una serie de pasos catalizados en parte por la recombinasa, conducen a la unión de las dos hélices formando al menos una unión de Holliday, en la que un segmento de una hebra simple es anillado con la hebra complementaria en la otra hélice. La unión de Holliday es una estructura de unión tetrahédrica que puede moverse a lo largo del par de cromosomas, intercambiando una hebra por otra. La reacción de recombinación se detiene por el corte de la unión y la reunión de los segmentos de ADN liberados.[119]​

Evolución del metabolismo de ADN

editar
Véase también: Hipótesis del mundo de ARN

El ADN contiene la información genética que permite a la mayoría de los seres vivientes funcionar, crecer y reproducirse. Sin embargo, no está claro durante cuánto tiempo ha ejercido esta función en los ~3000 millones de años de la historia de la vida, ya que se ha propuesto que las formas de vida más tempranas podrían haber utilizado ARN como material genético.[120]​[121]​ El ARN podría haber funcionado como la parte central de un metabolismo primigenio, ya que puede transmitir información genética y simultáneamente actuar como catalizador formando parte de las ribozimas.[122]​ Este antiguo Mundo de ARN donde los ácidos nucleicos funcionarían como catalizadores y como almacenes de información genética podría haber influido en la evolución del código genético actual, basado en cuatro nucleótidos. Esto se debería a que el número de bases únicas en un organismo es un compromiso entre un número pequeño de bases (lo que aumentaría la precisión de la replicación) y un número grande de bases (que a su vez aumentaría la eficiencia catalítica de las ribozimas).[123]​

Desafortunadamente, no se cuenta con evidencia directa de los sistemas genéticos ancestrales porque la recuperación del ADN a partir de la mayor parte de los fósiles es imposible. Esto se debe a que el ADN es capaz de sobrevivir en el medio ambiente durante menos de un millón de años, y luego empieza a degradarse lentamente en fragmentos de menor tamaño en solución.[124]​ Algunas investigaciones pretenden que se ha obtenido ADN más antiguo, por ejemplo un informe sobre el aislamiento de una bacteria viable a partir de un cristal salino de 250 millones de años de antigüedad,[125]​ pero estos datos son controvertidos.[126]​[127]​

Sin embargo, pueden utilizarse herramientas de evolución molecular para inferir los genomas de organismos ancestrales a partir de organismos contemporáneos.[128]​[129]​ En muchos casos, estas inferencias son suficientemente fiables, de manera que una biomolécula codificada en un genoma ancestral puede resucitarse en el laboratorio para ser estudiada hoy.[130]​[131]​ Una vez que la biomolécula ancestral se ha resucitado, sus propiedades pueden ofrecer inferencias sobre ambientes y estilos de vida primigenios. Este proceso se relaciona con el campo emergente de la paleogenética experimental.[132]​

A pesar de todo, el proceso de trabajo hacia atrás desde el presente tiene limitaciones inherentes, razón por la cual otros investigadores tratan de elucidar el mecanismo evolutivo trabajando desde el origen de la Tierra en adelante. Dada suficiente información sobre la química en el cosmos, la manera en la que las sustancias cósmicas podrían haberse depositado en la Tierra, y las transformaciones que podrían haber tenido lugar en la superficie terrestre primigenia, tal vez podríamos ser capaces de aprender sobre los orígenes para desarrollar modelos de evolución ulterior de la información genética[133]​ (véase también el artículo sobre el origen de la vida).

Técnicas comunes

editar

El conocimiento de la estructura del ADN ha permitido el desarrollo de multitud de herramientas tecnológicas que explotan sus propiedades fisicoquímicas para analizar su implicación en problemas concretos: por ejemplo, desde análisis filogeńeticos para detectar similitudes entre diferentes taxones, a la caracterización de la variabilidad individual de un paciente en su respuesta a un determinado fármaco, pasando por un enfoque global, a nivel genómico, de cualquier característica específica en un grupo de individuos de interés. [134]​

Podemos clasificar las metodologías de análisis del ADN en aquellas que buscan su multiplicación, ya in vivo, como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), ya in vitro, como la clonación, y aquellas que explotan las propiedades específicas de elementos concretos, o de genomas adecuadamente clonados. Es el caso de la secuenciación de ADN y de la hibridación con sondas específicas (Southern blot y chips de ADN).

Tecnología del ADN recombinante

editar
Artículo principal: ADN recombinante

La tecnología del ADN recombinante, piedra angular de la ingeniería genética, permite propagar grandes cantidades de un fragmento de ADN de interés, el cual se dice que ha sido clonado. Para ello, debe introducirse dicho fragmento en otro elemento de ADN, generalmente un plásmido, que posee en su secuencia los elementos necesarios para que la maquinaria celular de un hospedador, normalmente Escherichia coli, lo replique. De este modo, una vez transformada la cepa bacteriana, el fragmento de ADN clonado se reproduce cada vez que aquella se divide.[135]​

Para clonar la secuencia de ADN de interés, se emplean enzimas como herramientas de corte y empalme del fragmento y del vector (el plásmido). Dichas enzimas corresponden a dos grupos: en primer lugar, las enzimas de restricción, que poseen la capacidad de reconocer y cortar secuencias específicas; en segundo lugar, la ADN ligasa, que establece un enlace covalente entre extremos de ADN compatibles[134]​ (ver sección Nucleasas y ligasas).

Secuenciación

editar
Artículo principal: Secuenciación de ADN

La secuenciación del ADN consiste en dilucidar el orden de los nucleótidos de un polímero de ADN de cualquier longitud, si bien suele dirigirse hacia la determinación de genomas completos, debido a que las técnicas actuales permiten realizar esta secuenciación a gran velocidad, lo cual ha sido de gran importancia para proyectos de secuenciación a gran escala como el Proyecto Genoma Humano. Otros proyectos relacionados, en ocasiones fruto de la colaboración de científicos a escala mundial, han establecido la secuencia completa del ADN de muchos genomas de animales, plantas y microorganismos.

El método de secuenciación de Sanger ha sido el más empleado durante el siglo XX. Se basa en la síntesis de ADN en presencia de didesoxinucleósidos, compuestos que, a diferencia de los desoxinucleósidos normales (dNTPs), carecen de un grupo hidroxilo en su extremo 3'. Aunque los didesoxinucleótidos trifosfatados (ddNTPs) pueden incorporarse a la cadena en síntesis, la carencia de un extremo 3'‑OH imposibilita la generación de un nuevo enlace fosfodiéster con el nucleósido siguiente; por tanto, provocan la terminación de la síntesis. Por esta razón, el método de secuenciación también se denomina «de terminación de cadena». La reacción se realiza usualmente preparando un tubo con el ADN molde, la polimerasa, un cebador, dNTPs convencionales y una pequeña cantidad de ddNTPs marcados fluorescentemente en su base nitrogenada. De este modo, el ddTTP puede ir marcado en azul, el ddATP en rojo, etc. Durante la polimerización, se van truncando las cadenas crecientes, al azar, en distintas posiciones. Por tanto, se produce una serie de productos de distinto tamaño, coincidiendo la posición de la terminación debido a la incorporación del ddNTP correspondiente. Una vez terminada la reacción, es posible correr la mezcla en una electroforesis capilar (que resuelve todos los fragmentos según su longitud) en la cual se lee la fluorescencia para cada posición del polímero. En nuestro ejemplo, la lectura azul‑rojo‑azul‑azul se traduciría como TATT.[136]​[137]​

Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)

editar
Artículo principal: Reacción en cadena de la polimerasa

La reacción en cadena de la polimerasa, habitualmente conocida como PCR por sus siglas en inglés, es una técnica de biología molecular descrita en 1986 por Kary Mullis,[138]​ cuyo objetivo es obtener un gran número de copias de un fragmento de ADN dado, partiendo de una escasa cantidad de aquel. Para ello, se emplea una ADN polimerasa termoestable que, en presencia de una mezcla de los cuatro desoxinucleótidos, un tampón de la fuerza iónica adecuada y los cationes precisos para la actividad de la enzima, dos oligonucleótidos (denominados cebadores) complementarios aparte de la secuencia (situados a distancia suficiente y en sentido antiparalelo) y bajo unas condiciones de temperatura adecuadas, moduladas por un aparato denominado termociclador, genera exponencialmente nuevos fragmentos de ADN semejantes al original y acotados por los dos cebadores.[135]​

La PCR puede efectuarse como una técnica de punto final, esto es, como una herramienta de generación del ADN deseado, o como un método continuo, en el que se evalúe dicha polimerización a tiempo real. Esta última variante es común en la PCR cuantitativa.[134]​

Southern blot

editar
Artículo principal: Southern blot

El método de «hibridación Southern» o Southern blot (el nombre original en el idioma inglés) permite la detección de una secuencia de ADN en una muestra compleja o no del ácido nucleico. Para ello, combina una separación mediante masa y carga (efectuada mediante una electroforesis en gel) con una hibridación con una sonda de ácido nucleico marcada de algún modo (ya sea con radiactividad o con un compuesto químico) que, tras varias reacciones, dé lugar a la aparición de una señal de color o fluorescencia. Dicha hibridación se realiza tras la transferencia del ADN separado mediante la electroforesis a una membrana de filtro. Una técnica semejante, pero en la cual no se produce la mencionada separación electroforética se denomina dot blot.

El método recibe su nombre en honor a su inventor, el biólogo inglés Edwin Southern.[139]​ Por analogía al método Southern, se han desarrollado técnicas semejantes que permiten la detección de secuencias dadas de ARN (método Northern, que emplea sondas de ARN o ADN marcadas)[140]​ o de proteínas específicas (técnica Western, basada en el uso de anticuerpos).[141]​

Chips de ADN

editar
Artículo principal: Chip de ADN
 
Microarray con 37 500 oligonucleótidos específicos. Arriba a la izquierda se puede apreciar una región ampliada del chip.

Los chips de ADN son colecciones de oligonucleótidos de ADN complementario dispuestos en hileras fijadas sobre un soporte, frecuentemente de cristal. Se utilizan para el estudio de mutaciones de genes conocidos o para monitorizar la expresión génica de una preparación de ARN.

Aplicaciones

editar

Ingeniería genética

editar
Véanse también: Ingeniería genética y Biología molecular.

La investigación sobre el ADN tiene un impacto significativo, especialmente en el ámbito de la medicina, pero también en agricultura y ganadería (donde los objetivos son los mismos que con las técnicas tradicionales que el hombre lleva utilizando desde hace milenios —la domesticación, la selección y los cruces dirigidos— para obtener variedades de animales y plantas más productivos). La moderna biología y bioquímica hacen uso intensivo de la tecnología del ADN recombinante, introduciendo genes de interés en seres vivos, con el objetivo de expresar una proteína recombinante concreta, que puede ser:

  • aislada para su uso posterior: por ejemplo, se pueden transformar microorganismos para convertirlos en auténticas fábricas que producen grandes cantidades de sustancias útiles, como insulina o vacunas, que posteriormente se aíslan y se utilizan terapéuticamente.[142]​[143]​[144]​
  • necesaria para reemplazar la expresión de un gen endógeno dañado que ha dado lugar a una patología, lo que permitiría el restablecimiento de la actividad de la proteína perdida y finalmente la recuperación del estado fisiológico normal, no patológico. Este es el objetivo de la terapia génica, uno de los campos en los que se está trabajando activamente en medicina, analizando ventajas e inconvenientes de diferentes sistemas de administración del gen (virales y no virales) y los mecanismos de selección del punto de integración de los elementos genéticos (distintos para los virus y los transposones) en el genoma diana.[145]​ En este caso, antes de plantearse la posibilidad de realizar una terapia génica en una determinada patología, es fundamental comprender el impacto del gen de interés en el desarrollo de dicha patología, para lo cual es necesario el desarrollo de un modelo animal, eliminando o modificando dicho gen en un animal de laboratorio, mediante la técnica knockout.[146]​ Solo en el caso de que los resultados en el modelo animal sean satisfactorios se procedería a analizar la posibilidad de restablecer el gen dañado mediante terapia génica.
  • utilizada para enriquecer un alimento: por ejemplo, la composición de la leche (una importante fuente de proteínas para el consumo humano y animal) puede modificarse mediante transgénesis, añadiendo genes exógenos y desactivando genes endógenos para mejorar su valor nutricional, reducir infecciones en las glándulas mamarias, proporcionar a los consumidores proteínas antipatógenas y preparar proteínas recombinantes para su uso farmacéutico.[147]​[148]​
  • útil para mejorar la resistencia del organismo transformado: por ejemplo en plantas se pueden introducir genes que confieren resistencia a patógenos (virus, insectos, hongos…), así como a agentes estresantes abióticos (salinidad, sequedad, metales pesados…).[149]​[150]​[151]​

Medicina forense

editar
Véase también: Huella genética

Los médicos forenses pueden utilizar el ADN presente en la sangre, el semen, la piel, la saliva o el pelo en la escena de un crimen, para identificar al responsable. Esta técnica se denomina huella genética, o también «perfil de ADN». Al realizar la huella genética, se compara la longitud de secciones altamente variables de ADN repetitivo, como los microsatélites, entre personas diferentes. Este método es frecuentemente muy fiable para identificar a un criminal.[152]​ Sin embargo, la identificación puede complicarse si la escena está contaminada con ADN de personas diferentes.[153]​ La técnica de la huella genética fue desarrollada en 1984 por el genetista británico sir Alec Jeffreys,[154]​ y fue utilizada por primera vez en medicina forense para condenar a Colin Pitchfork por los asesinatos de Narborough en 1983 y de Enderby en 1986.[155]​ Se puede requerir a las personas acusadas de ciertos tipos de crímenes que proporcionen una muestra de ADN para introducirlos en una base de datos. Esto ha facilitado la labor de los investigadores en la resolución de casos antiguos, donde solo se obtuvo una muestra de ADN de la escena del crimen, en algunos casos permitiendo exonerar a un convicto. La huella genética también puede utilizarse para identificar víctimas de accidentes en masa,[156]​ o para realizar pruebas de consanguinidad (prueba de paternidad).[157]​

Bioinformática

editar
Véase también: Bioinformática

La bioinformática implica la manipulación, búsqueda y extracción de información de los datos de la secuencia del ADN. El desarrollo de las técnicas para almacenar y buscar secuencias de ADN ha generado avances en el desarrollo de software de los ordenadores, para muchas aplicaciones, especialmente algoritmos de búsqueda de frases, aprendizaje automático y teorías de bases de datos.[158]​ La búsqueda de frases o algoritmos de coincidencias, que buscan la ocurrencia de una secuencia de letras dentro de una secuencia de letras mayor, se desarrolló para buscar secuencias específicas de nucleótidos.[159]​ En otras aplicaciones como editores de textos, incluso algoritmos simples pueden funcionar, pero las secuencias de ADN pueden generar que estos algoritmos presenten un comportamiento de casi-el-peor-caso, debido al bajo número de caracteres. El problema relacionado del alineamiento de secuencias persigue identificar secuencias homólogas y localizar mutaciones específicas que las diferencian. Estas técnicas, fundamentalmente el alineamiento múltiple de secuencias, se utilizan al estudiar las relaciones filogenéticas y la función de las proteínas.[160]​ Las colecciones de datos que representan secuencias de ADN del tamaño de un genoma, tales como las producidas por el Proyecto Genoma Humano, son difíciles de usar sin anotaciones, que marcan la localización de los genes y los elementos reguladores en cada cromosoma. Las regiones de ADN que tienen patrones asociados con genes que codifican proteínas —o ARN— pueden identificarse por algoritmos de localización de genes, lo que permite a los investigadores predecir la presencia de productos génicos específicos en un organismo incluso antes de que haya sido aislado experimentalmente.[161]​

Nanotecnología de ADN

editar
 
La estructura de ADN de la izquierda (mostrada de forma esquemática) se auto-ensambla en la estructura visualizada por microscopía de fuerza atómica a la derecha. La nanotecnología de ADN es el campo que busca diseñar estructuras a nanoescala utilizando las propiedades de reconocimiento molecular de las moléculas de ADN. Imagen de Strong, 2004. [5]
Véase también: Nanotecnología

La nanotecnología de ADN utiliza las propiedades únicas de reconocimiento molecular del ADN y otros ácidos nucleicos para crear complejos ramificados auto-ensamblados con propiedades útiles. En este caso, el ADN se utiliza como un material estructural, más que como un portador de información biológica.[162]​ Esto ha conducido a la creación de láminas periódicas de dos dimensiones (ambas basadas en azulejos, así como usando el método de ADN origami[163]​), además de estructuras en tres dimensiones con forma de poliedros.

Historia, antropología y paleontología

editar
Véanse también: Filogenia y Genealogía molecular.

A lo largo del tiempo, el ADN almacena mutaciones que se heredan y, por tanto, contiene información histórica, de manera que comparando secuencias de ADN, los genetistas pueden inferir la historia evolutiva de los organismos, su filogenia.[164]​ La investigación filogenética es una herramienta fundamental en biología evolutiva. Si se comparan las secuencias de ADN dentro de una especie, los genetistas de poblaciones pueden conocer la historia de poblaciones particulares. Esto se puede utilizar en una amplia variedad de estudios, desde ecología hasta antropología, como ilustra el análisis de ADN llevado a cabo para identificar las Diez Tribus Perdidas de Israel.[165]​[166]​ Por otro lado, el ADN también se utiliza para estudiar relaciones familiares recientes.

Igualmente en paleontología (en la paleogenética) el ADN en algunos casos también se puede utilizar para estudiar a especies extintas (ADN fósil).

Véase también

editar

Referencias

editar

Notas

editar
  1. ↑ Malavé, Dr Antonio Alcalá (4 de noviembre de 2015). Genética de la emoción: El origen de la enfermedad. Penguin Random House Grupo Editorial España. ISBN 9788490692066. Consultado el 1 de octubre de 2019. 
  2. ↑ «Diccionario de genética - ADN». Instituto Nacional del Cáncer (Estados Unidos). 20 de julio de 2012. Consultado el 21 de octubre de 2023. 
  3. ↑ Mazzotta, Guillermo Cejas (2000). Identificación por ADN. Ediciones Jurídicas Cuyo. ISBN 9789875270145. Consultado el 1 de octubre de 2019. 
  4. ↑ Ferrer, Sergio. «El verdadero sentido de la vida.» Journal of Feelsynapsis (JoF). ISSN 2254-3651. 2011 (1): 119-127.
  5. ↑ «ácido desoxirribonucleico». Real Academia Nacional de Medicina de España. 
  6. ↑ Dahm, R. (2005). «Friedrich Miescher and the discovery of DNA». Dev Biol 278 (2): 274-88. ISSN 0012-1606. PMID 15680349. doi:10.1016/j.ydbio.2004.11.028. 
  7. ↑ http://www.terradaily.com/reports/Building_Life_On_Earth_999.html Dato del descubrimiento del ADN en terradaily.com
  8. ↑ Dahm, R. (2008). «Discovering DNA: Friedrich Miescher and the early years of nucleic acid research». Hum Genet 122 (2): 565-581. PMID 17901982. 
  9. ↑ Levene, P. (1919). «The structure of yeast nucleic acid». J Biol Chem 40 (2): 415-24. Archivado desde el original el 29 de junio de 2009. Consultado el 31 de julio de 2008. 
  10. ↑ a b Dhanda, J. S.; Shyam, S. Chauhan (22-Feb-2008). «Structural Levels of Nucleic Acids and Sequencing.». En All India Institute of Medical Sciences, ed. Molecular Biology. (Department of Biochemistry edición). New Delhi – 110 029. Archivado desde el original el 3 de marzo de 2014. Consultado el 7 de octubre de 2008.  (Revisado el 7 de octubre de 2008).
  11. ↑ Astbury, W. (1947). «Nucleic acid». Symp. SOC. Exp. Bbl 1 (66). 
  12. ↑ Lorenz, M. G., Wackernagel, W. (1994). «Bacterial gene transfer by natural genetic transformation in the environment». Microbiol. Rev. 58 (3): 563-602. PMID 7968924. 
  13. ↑ Avery, O., MacLeod, C., McCarty, M. (1944). «Studies on the chemical nature of the substance inducing transformation of pneumococcal types. Inductions of transformation by a desoxyribonucleic acid fraction isolated from pneumococcus type III». J Exp Med 79 (2): 137-158. 
  14. ↑ Hershey, A., Chase, M. (1952). «Independent functions of viral protein and nucleic acid in growth of bacteriophage». J Gen Physiol 36 (1): 39-56. PMID 12981234. 
  15. ↑ Watson, J. D. y Crick, F. H. C. (1953). «A Structure for Deoxyribose Nucleic Acid». Nature 171: 737-738. PMID 13054692. doi:10.1038/171737a0. Consultado el 13 de febrero de 2007. 
  16. ↑ Nature Archives Double Helix of DNA: 50 Years
  17. ↑ Franklin, R. E. (1953). «Molecular Configuration in Sodium Thymonucleate. Franklin, R. y Gosling R. G.». Nature 171: 740-741. PMID 13054694. doi:10.1038/171740a0. 
  18. ↑ «Original X-ray diffraction image». Archivado desde el original el 30 de enero de 2009. Consultado el 31 de julio de 2008. 
  19. ↑ Wilkins, M. H. F., A. R. Stokes & H. R. Wilson (1953). «Molecular Structure of Deoxypentose Nucleic Acids». Nature 171: 738-740. PMID 13054693. doi:10.1038/171738a0. 
  20. ↑ The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1962 Nobelprize.org (Revisado el 22 de diciembre de 2006..
  21. ↑ Maddox, Brenda (23 de enero de 2003). «The double helix and the 'wronged heroine'». Nature 421: 407-408. PMID 12540909. doi:10.1038/nature01399. Archivado desde el original el 17 de octubre de 2016. Consultado el 31 de julio de 2008. 
  22. ↑ a b Alberts, Bruce; Alexander Johnson, Julian Lewis, Martin Raff, Keith Roberts y Peter Walters (2002). Molecular Biology of the Cell; Fourth Edition. Nueva York y Londres: Garland Science. ISBN 0-8153-3218-1. 
  23. ↑ Butler, John M. (2001) Forensic DNA Typing, Elsevier. pp. 14-15. ISBN 978-0-12-147951-0.
  24. ↑ Mandelkern, M., Elias, J., Eden, D., Crothers, D. (1981). «The dimensions of DNA in solution». J Mol Biol 152 (1): 153-61. PMID 7338906. 
  25. ↑ Gregory, S., et al. (2006). «The DNA sequence and biological annotation of human chromosome 1». Nature 441 (7091): 315-21. PMID 16710414. 
  26. ↑ «Due credit». Nature 496 (7445): 270. 18 de abril de 2013. PMID 23607133. doi:10.1038/496270a. 
  27. ↑ Witkowski J (2019). «The forgotten scientists who paved the way to the double helix». Nature 568 (7752): 308-309. Bibcode:2019Natur.568..308W. doi:10.1038/d41586-019-01176-9. 
  28. ↑ Watson, J., Crick, F. (1953). «Molecular structure of nucleic acids; a structure for deoxyribose nucleic acid». Nature 171 (4356): 737-8. PMID 13054692. 
  29. ↑ Andrew Bates (2005). «DNA structure». DNA topology. Oxford University Press. ISBN 0-19-850655-4. 
  30. ↑ a b c Berg, J., Tymoczko, J. y Stryer, L. (2002) Biochemistry. W. H. Freeman and Company ISBN 0-7167-4955-6.
  31. ↑ «IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature (CBN) - Abbreviations and Symbols for Nucleic Acids, Polynucleotides and their Constituents». iupac.qmul.ac.uk. Consultado el 22 de agosto de 2024. 
  32. ↑ a b Ghosh, Anirban; Bansal, Manju (Abril de 2003). «A glossary of DNA structures from A to Z». Acta Crystallographica. Section D, Biological Crystallography 59 (Pt 4): 620-626. ISSN 0907-4449. PMID 12657780. doi:10.1107/s0907444903003251. Consultado el 22 de agosto de 2024. 
  33. ↑ Clausen-Schaumann, H., Rief, M., Tolksdorf, C., Gaub, H. (2000). «Mechanical stability of single DNA molecules». Biophys J 78 (4): 1997-2007. PMID 10733978. 
  34. ↑ Ponnuswamy, P. K.; Gromiha, M. M. (21 de agosto de 1994). «On the conformational stability of oligonucleotide duplexes and tRNA molecules». Journal of Theoretical Biology 169 (4): 419-432. ISSN 0022-5193. PMID 7526075. doi:10.1006/jtbi.1994.1163. Consultado el 22 de agosto de 2024. 
  35. ↑ Erwin Chargaff Papers
  36. ↑ Chalikian, T., Völker, J., Plum, G., Breslauer, K. (1999). «A more unified picture for the thermodynamics of nucleic acid duplex melting: a characterization by calorimetric and volumetric techniques». Proc Natl Acad Sci U S A 96 (14): 7853-8. PMID 10393911. 
  37. ↑ deHaseth, P. L.; Helmann, J. D. (Junio de 1995). «Open complex formation by Escherichia coli RNA polymerase: the mechanism of polymerase-induced strand separation of double helical DNA». Molecular Microbiology 16 (5): 817-824. ISSN 0950-382X. PMID 7476180. doi:10.1111/j.1365-2958.1995.tb02309.x. Consultado el 22 de agosto de 2024. 
  38. ↑ Isaksson, J.; Acharya, S.; Barman, J.; Cheruku, P.; Chattopadhyaya, J. (28 de diciembre de 2004). «Single-stranded adenine-rich DNA and RNA retain structural characteristics of their respective double-stranded conformations and show directional differences in stacking pattern». Biochemistry 43 (51): 15996-16010. ISSN 0006-2960. PMID 15609994. doi:10.1021/bi048221v. Consultado el 22 de agosto de 2024. 
  39. ↑ a b c d Hib, J. & De Robertis, E. D. P. 1998. Fundamentos de biología celular y molecular. El Ateneo, 3.ª edición, 416 páginas. ISBN 950-02-0372-3. ISBN 978-950-02-0372-2
  40. ↑ a b c De Robertis, E. D. P. 1998. Biología celular y molecular. El Ateneo, 617 páginas. ISBN 950-02-0364-2. ISBN 978-950-02-0364-7
  41. ↑ McGraw-Hill (16 de junio de 2006). Quinica Organica, 6th Ed, Carey, 2006: Organic Chemistry. Bukupedia. Consultado el 29 de octubre de 2019. 
  42. ↑ Basu, H. S.; Feuerstein, B. G.; Zarling, D. A.; Shafer, R. H.; Marton, L. J. (Octubre de 1988). «Recognition of Z-RNA and Z-DNA determinants by polyamines in solution: experimental and theoretical studies». Journal of Biomolecular Structure & Dynamics 6 (2): 299-309. ISSN 0739-1102. PMID 2482766. doi:10.1080/07391102.1988.10507714. Consultado el 22 de agosto de 2024. 
  43. ↑ Leslie, A. G.; Arnott, S.; Chandrasekaran, R.; Ratliff, R. L. (15 de octubre de 1980). «Polymorphism of DNA double helices». Journal of Molecular Biology 143 (1): 49-72. ISSN 0022-2836. PMID 7441761. doi:10.1016/0022-2836(80)90124-2. Consultado el 22 de agosto de 2024. 
  44. ↑ Wahl, M. C.; Sundaralingam, M. (1997). «Crystal structures of A-DNA duplexes». Biopolymers 44 (1): 45-63. ISSN 0006-3525. PMID 9097733. doi:10.1002/(SICI)1097-0282(1997)44:1<45::AID-BIP4>3.0.CO;2-#. Consultado el 22 de agosto de 2024. 
  45. ↑ Lu, X. J.; Shakked, Z.; Olson, W. K. (21 de julio de 2000). «A-form conformational motifs in ligand-bound DNA structures». Journal of Molecular Biology 300 (4): 819-840. ISSN 0022-2836. PMID 10891271. doi:10.1006/jmbi.2000.3690. Consultado el 22 de agosto de 2024. 
  46. ↑ Rothenburg, S.; Koch-Nolte, F.; Haag, F. (Diciembre de 2001). «DNA methylation and Z-DNA formation as mediators of quantitative differences in the expression of alleles». Immunological Reviews 184: 286-298. ISSN 0105-2896. PMID 12086319. doi:10.1034/j.1600-065x.2001.1840125.x. Consultado el 22 de agosto de 2024. 
  47. ↑ Oh, Doo-Byoung; Kim, Yang-Gyun; Rich, Alexander (24 de diciembre de 2002). «Z-DNA-binding proteins can act as potent effectors of gene expression in vivo». Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 99 (26): 16666-16671. ISSN 0027-8424. PMID 12486233. doi:10.1073/pnas.262672699. Consultado el 22 de agosto de 2024. 
  48. ↑ NDB UD0017
  49. ↑ a b Greider, C. W.; Blackburn, E. H. (Diciembre de 1985). «Identification of a specific telomere terminal transferase activity in Tetrahymena extracts». Cell 43 (2 Pt 1): 405-413. ISSN 0092-8674. PMID 3907856. doi:10.1016/0092-8674(85)90170-9. Consultado el 22 de agosto de 2024. 
  50. ↑ a b Nugent, C. I.; Lundblad, V. (15 de abril de 1998). «The telomerase reverse transcriptase: components and regulation». Genes & Development 12 (8): 1073-1085. ISSN 0890-9369. PMID 9553037. doi:10.1101/gad.12.8.1073. Consultado el 22 de agosto de 2024. 
  51. ↑ Wright, W. E.; Tesmer, V. M.; Huffman, K. E.; Levene, S. D.; Shay, J. W. (1 de noviembre de 1997). «Normal human chromosomes have long G-rich telomeric overhangs at one end». Genes & Development 11 (21): 2801-2809. ISSN 0890-9369. PMID 9353250. doi:10.1101/gad.11.21.2801. Consultado el 22 de agosto de 2024. 
  52. ↑ a b Burge, Sarah; Parkinson, Gary N.; Hazel, Pascale; Todd, Alan K.; Neidle, Stephen (2006). «Quadruplex DNA: sequence, topology and structure». Nucleic Acids Research 34 (19): 5402-5415. ISSN 1362-4962. PMC 1636468. PMID 17012276. doi:10.1093/nar/gkl655. Consultado el 22 de agosto de 2024. 
  53. ↑ Parkinson, Gary N.; Lee, Michael P. H.; Neidle, Stephen (20 de junio de 2002). «Crystal structure of parallel quadruplexes from human telomeric DNA». Nature 417 (6891): 876-880. ISSN 0028-0836. PMID 12050675. doi:10.1038/nature755. Consultado el 22 de agosto de 2024. 
  54. ↑ Griffith, J. D.; Comeau, L.; Rosenfield, S.; Stansel, R. M.; Bianchi, A.; Moss, H.; de Lange, T. (14 de mayo de 1999). «Mammalian telomeres end in a large duplex loop». Cell 97 (4): 503-514. ISSN 0092-8674. PMID 10338214. doi:10.1016/s0092-8674(00)80760-6. Consultado el 22 de agosto de 2024. 
  55. ↑ Created from PDB 1D65 Archivado el 28 de septiembre de 2008 en Wayback Machine.
  56. ↑ a b Watson, J. D.; Baker, T. A.; Bell, S. P.; Gann, A.; Levine, M. y Losick, R (2006). «6. Las estructuras del DNA y el RNA». Biología Molecular del Gen (5ª Ed.) (Madrid: Médica Panamericana). ISBN 84-7903-505-6. 
  57. ↑ Wing, R.; Drew, H.; Takano, T.; Broka, C.; Tanaka, S.; Itakura, K.; Dickerson, R. E. (23 de octubre de 1980). «Crystal structure analysis of a complete turn of B-DNA». Nature 287 (5784): 755-758. ISSN 0028-0836. PMID 7432492. doi:10.1038/287755a0. Consultado el 22 de agosto de 2024. 
  58. ↑ Pabo, C. O.; Sauer, R. T. (1984). «Protein-DNA recognition». Annual Review of Biochemistry 53: 293-321. ISSN 0066-4154. PMID 6236744. doi:10.1146/annurev.bi.53.070184.001453. Consultado el 22 de agosto de 2024. 
  59. ↑ Hüttenhofer, Alexander; Schattner, Peter; Polacek, Norbert (Mayo de 2005). «Non-coding RNAs: hope or hype?». Trends in genetics: TIG 21 (5): 289-297. ISSN 0168-9525. PMID 15851066. doi:10.1016/j.tig.2005.03.007. Consultado el 23 de agosto de 2024. 
  60. ↑ Munroe, Stephen H. (1 de noviembre de 2004). «Diversity of antisense regulation in eukaryotes: multiple mechanisms, emerging patterns». Journal of Cellular Biochemistry 93 (4): 664-671. ISSN 0730-2312. PMID 15389973. doi:10.1002/jcb.20252. Consultado el 23 de agosto de 2024. 
  61. ↑ Makalowska, Izabela; Lin, Chiao-Feng; Makalowski, Wojciech (Febrero de 2005). «Overlapping genes in vertebrate genomes». Computational Biology and Chemistry 29 (1): 1-12. ISSN 1476-9271. PMID 15680581. doi:10.1016/j.compbiolchem.2004.12.006. Consultado el 23 de agosto de 2024. 
  62. ↑ Johnson, Zackary I.; Chisholm, Sallie W. (Noviembre de 2004). «Properties of overlapping genes are conserved across microbial genomes». Genome Research 14 (11): 2268-2272. ISSN 1088-9051. PMID 15520290. doi:10.1101/gr.2433104. Consultado el 23 de agosto de 2024. 
  63. ↑ Lamb, R. A.; Horvath, C. M. (Agosto de 1991). «Diversity of coding strategies in influenza viruses». Trends in genetics: TIG 7 (8): 261-266. ISSN 0168-9525. PMC 7173306. PMID 1771674. doi:10.1016/0168-9525(91)90326-L. Consultado el 23 de agosto de 2024. 
  64. ↑ Benham, Craig J.; Mielke, Steven P. (2005). «DNA mechanics». Annual Review of Biomedical Engineering 7: 21-53. ISSN 1523-9829. PMID 16004565. doi:10.1146/annurev.bioeng.6.062403.132016. Consultado el 23 de agosto de 2024. 
  65. ↑ a b Champoux, J. J. (2001). «DNA topoisomerases: structure, function, and mechanism». Annual Review of Biochemistry 70: 369-413. ISSN 0066-4154. PMID 11395412. doi:10.1146/annurev.biochem.70.1.369. Consultado el 23 de agosto de 2024. 
  66. ↑ a b Wang, James C. (Junio de 2002). «Cellular roles of DNA topoisomerases: a molecular perspective». Nature Reviews. Molecular Cell Biology 3 (6): 430-440. ISSN 1471-0072. PMID 12042765. doi:10.1038/nrm831. Consultado el 23 de agosto de 2024. 
  67. ↑ Klose, R., Bird, A. (2006). «Genomic DNA methylation: the mark and its mediators». Trends Biochem Sci 31 (2): 89-97. PMID 16403636. doi:10.1016/j.tibs.2005.12.008. 
  68. ↑ Bird, A. (2002). «DNA methylation patterns and epigenetic memory». Genes Dev 16 (1): 6-21. PMID 11782440. doi:10.1101/gad.947102. 
  69. ↑ Walsh, C., Xu, G. (2006). «Cytosine methylation and DNA repair». Curr Top Microbiol Immunol 301: 283-315. PMID 16570853. doi:10.1007/3-540-31390-7_11. 
  70. ↑ Ratel, David; Ravanat, Jean-Luc; Berger, François; Wion, Didier (Marzo de 2006). «N6-methyladenine: the other methylated base of DNA». BioEssays: News and Reviews in Molecular, Cellular and Developmental Biology 28 (3): 309-315. ISSN 0265-9247. PMC 2754416. PMID 16479578. doi:10.1002/bies.20342. Consultado el 23 de agosto de 2024. 
  71. ↑ Gommers-Ampt, J. H.; Van Leeuwen, F.; de Beer, A. L.; Vliegenthart, J. F.; Dizdaroglu, M.; Kowalak, J. A.; Crain, P. F.; Borst, P. (17 de diciembre de 1993). «beta-D-glucosyl-hydroxymethyluracil: a novel modified base present in the DNA of the parasitic protozoan T. brucei». Cell 75 (6): 1129-1136. ISSN 0092-8674. PMID 8261512. doi:10.1016/0092-8674(93)90322-h. Consultado el 23 de agosto de 2024. 
  72. ↑ Creado a partir de: PDB 1JDG
  73. ↑ Douki, T., Reynaud-Angelin, A., Cadet, J., Sage, E. (2003). «Bipyrimidine photoproducts rather than oxidative lesions are the main type of DNA damage involved in the genotoxic effect of solar UVA radiation». Biochemistry 42 (30): 9221-6. PMID 12885257. doi:10.1021/bi034593c. ,
  74. ↑ Cadet, J., Delatour, T., Douki, T., Gasparutto, D., Pouget, J., Ravanat, J., Sauvaigo, S. (1999). «Hydroxyl radicals and DNA base damage». Mutat Res 424 (1-2): 9-21. PMID 10064846. 
  75. ↑ Shigenaga, M., Gimeno, C., Ames, B. (1989). «Urinary 8-hydroxy-2′-deoxyguanosine as a biological marker of in vivo oxidative DNA damage». Proc Natl Acad Sci U S A 86 (24): 9697-701. PMID 2602371. doi:10.1073/pnas.86.24.9697. 
  76. ↑ Cathcart, R., Schwiers, E., Saul, R., Ames, B. (1984). «Thymine glycol and thymidine glycol in human and rat urine: a possible assay for oxidative DNA damage». Proc Natl Acad Sci U S A 81 (18): 5633-7. PMID 6592579. doi:10.1073/pnas.81.18.5633. 
  77. ↑ Valerie, K., Povirk, L. (2003). «Regulation and mechanisms of mammalian double-strand break repair». Oncogene 22 (37): 5792-812. PMID 12947387. doi:10.1038/sj.onc.1206679. 
  78. ↑ Ferguson, L. R.; Denny, W. A. (Septiembre de 1991). «The genetic toxicology of acridines». Mutation Research 258 (2): 123-160. ISSN 0027-5107. PMID 1881402. doi:10.1016/0165-1110(91)90006-h. Consultado el 23 de agosto de 2024. 
  79. ↑ Jeffrey, A. (1985). «DNA modification by chemical carcinogens». Pharmacol Ther 28 (2): 237-72. PMID 3936066. doi:10.1016/0163-7258(85)90013-0. 
  80. ↑ Stephens, T., Bunde, C., Fillmore, B. (2000). «Mechanism of action in thalidomide teratogenesis». Biochem Pharmacol 59 (12): 1489-99. PMID 10799645. doi:10.1016/S0006-2952(99)00388-3. 
  81. ↑ Braña, M., Cacho, M., Gradillas, A., de Pascual-Teresa, B., Ramos, A. (2001). «Intercalators as anticancer drugs». Curr Pharm Des 7 (17): 1745-80. PMID 11562309. doi:10.2174/1381612013397113. 
  82. ↑ Thanbichler, M., Wang, S., Shapiro, L. (2005). «The bacterial nucleoid: a highly organized and dynamic structure». J Cell Biochem 96 (3): 506-21. PMID 15988757. doi:10.1002/jcb.20519. 
  83. ↑ Bank, RCSB Protein Data. «RCSB PDB - 1MSW: Structural basis for the transition from initiation to elongation transcription in T7 RNA polymerase». www.rcsb.org (en inglés estadounidense). Consultado el 23 de agosto de 2024. 
  84. ↑ Wolfsberg, T., McEntyre, J., Schuler, G. (2001). «Guide to the draft human genome». Nature 409 (6822): 824-6. PMID 11236998. doi:10.1038/35057000. 
  85. ↑ ENCODE Project Consortium; Birney, Ewan; Stamatoyannopoulos, John A.; Dutta, Anindya; Guigó, Roderic; Gingeras, Thomas R.; Margulies, Elliott H.; Weng, Zhiping et al. (14 de junio de 2007). «Identification and analysis of functional elements in 1% of the human genome by the ENCODE pilot project». Nature 447 (7146): 799-816. ISSN 1476-4687. PMC 2212820. PMID 17571346. doi:10.1038/nature05874. Consultado el 23 de agosto de 2024. 
  86. ↑ Gregory T (2005). «The C-value enigma in plants and animals: a review of parallels and an appeal for partnership». Ann Bot (Lond) 95 (1): 133-46. PMID 15596463. doi:10.1093/aob/mci009. 
  87. ↑ Yale University. Yale Researchers Find “Junk DNA” May Have Triggered Key Evolutionary Changes in Human Thumb and Foot. Archivado desde el original el 12 de septiembre de 2008. Consultado el 15 de septiembre de 2008. 
  88. ↑ Sandman, K., Pereira, S., Reeve, J. (1998). «Diversity of prokaryotic chromosomal proteins and the origin of the nucleosome». Cell Mol Life Sci 54 (12): 1350-64. PMID 9893710. doi:10.1007/s000180050259. 
  89. ↑ Dame, R. T. (2005). «The role of nucleoid-associated proteins in the organization and compaction of bacterial chromatin». Mol. Microbiol. 56 (4): 858-70. PMID 15853876. doi:10.1111/j.1365-2958.2005.04598.x. 
  90. ↑ Luger, K., Mäder, A., Richmond, R., Sargent, D., Richmond, T. (1997). «Crystal structure of the nucleosome core particle at 2.8 A resolution». Nature 389 (6648): 251-60. PMID 9305837. doi:10.1038/38444. 
  91. ↑ Jenuwein, T., Allis, C. (2001). «Translating the histone code». Science 293 (5532): 1074-80. PMID 11498575. doi:10.1126/science.1063127. 
  92. ↑ Ito, T. (2003). «Nucleosome assembly and remodeling». Current Topics in Microbiology and Immunology 274: 1-22. ISSN 0070-217X. PMID 12596902. doi:10.1007/978-3-642-55747-7_1. Consultado el 30 de septiembre de 2023. 
  93. ↑ Thomas J (2001). «HMG1 and 2: architectural DNA-binding proteins». Biochem Soc Trans 29 (Pt 4): 395-401. PMID 11497996. doi:10.1042/BST0290395. 
  94. ↑ Grosschedl, R., Giese, K., Pagel, J. (1994). «HMG domain proteins: architectural elements in the assembly of nucleoprotein structures». Trends Genet 10 (3): 94-100. PMID 8178371. doi:10.1016/0168-9525(94)90232-1. 
  95. ↑ Maeshima, Kazuhiro; Laemmli, Ulrich K. (Abril de 2003). «A two-step scaffolding model for mitotic chromosome assembly». Developmental Cell 4 (4): 467-480. ISSN 1534-5807. PMID 12689587. doi:10.1016/s1534-5807(03)00092-3. Consultado el 30 de septiembre de 2023. 
  96. ↑ Tavormina, Penny A.; Côme, Marie-George; Hudson, Joanna R.; Mo, Yin-Yuan; Beck, William T.; Gorbsky, Gary J. (8 de julio de 2002). «Rapid exchange of mammalian topoisomerase II alpha at kinetochores and chromosome arms in mitosis». The Journal of Cell Biology 158 (1): 23-29. ISSN 0021-9525. PMC 2173008. PMID 12105179. doi:10.1083/jcb.200202053. Consultado el 30 de septiembre de 2023. 
  97. ↑ Iftode, C., Daniely, Y., Borowiec, J. (1999). «Replication protein A (RPA): the eukaryotic SSB». Crit Rev Biochem Mol Biol 34 (3): 141-80. PMID 10473346. doi:10.1080/10409239991209255. 
  98. ↑ Creado a partir de PDB 1LMB
  99. ↑ Pabo, C., Sauer, R. (1984). «Protein-DNA recognition». Annu Rev Biochem 53: 293-321. PMID 6236744. doi:10.1146/annurev.bi.53.070184.001453. 
  100. ↑ Myers, L., Kornberg, R. (2000). «Mediator of transcriptional regulation». Annu Rev Biochem 69: 729-49. PMID 10966474. doi:10.1146/annurev.biochem.69.1.729. 
  101. ↑ Spiegelman, B., Heinrich, R. (2004). «Biological control through regulated transcriptional coactivators». Cell 119 (2): 157-67. PMID 15479634. doi:10.1016/j.cell.2004.09.037. 
  102. ↑ Li, Z., Van Calcar, S., Qu, C., Cavenee, W., Zhang, M., Ren, B. (2003). «A global transcriptional regulatory role for c-Myc in Burkitt's lymphoma cells». Proc Natl Acad Sci U S A 100 (14): 8164-9. PMID 12808131. doi:10.1073/pnas.1332764100. 
  103. ↑ Creado a partir de PDB 1RVA
  104. ↑ Bickle, T., Krüger, D. (1993). «Biology of DNA restriction». Microbiol Rev 57 (2): 434-50. PMID 8336674. 
  105. ↑ a b Doherty, A., Suh, S. (2000). «Structural and mechanistic conservation in DNA ligases.». Nucleic Acids Res 28 (21): 4051-8. PMID 11058099. doi:10.1093/nar/28.21.4051. 
  106. ↑ Schoeffler, A., Berger, J. (2005). «Recent advances in understanding structure-function relationships in the type II topoisomerase mechanism». Biochem Soc Trans 33 (Pt 6): 1465-70. PMID 16246147. doi:10.1042/BST20051465. 
  107. ↑ Tuteja, N., Tuteja, R. (2004). «Unraveling DNA helicases. Motif, structure, mechanism and function». Eur J Biochem 271 (10): 1849-63. PMID 15128295. doi:10.1111/j.1432-1033.2004.04094.x. 
  108. ↑ Joyce, C., Steitz, T. (1995). «Polymerase structures and function: variations on a theme?». J Bacteriol 177 (22): 6321-9. PMID 7592405. 
  109. ↑ Hubscher, U., Maga, G., Spadari, S. (2002). «Eukaryotic DNA polymerases». Annu Rev Biochem 71: 133-63. PMID 12045093. doi:10.1146/annurev.biochem.71.090501.150041. 
  110. ↑ Johnson, A., O'Donnell, M. (2005). «Cellular DNA replicases: components and dynamics at the replication fork». Annu Rev Biochem 74: 283-315. PMID 15952889. doi:10.1146/annurev.biochem.73.011303.073859. 
  111. ↑ Tarrago-Litvak, L., Andréola, M., Nevinsky, G., Sarih-Cottin, L., Litvak, S. (1994). «The reverse transcriptase of HIV-1: from enzymology to therapeutic intervention». FASEB J 8 (8): 497-503. PMID 7514143. 
  112. ↑ Martinez, E. (2002). «Multi-protein complexes in eukaryotic gene transcription». Plant Mol Biol 50 (6): 925-47. PMID 12516863. doi:10.1023/A:1021258713850. 
  113. ↑ Creado a partir de PDB 1M6G
  114. ↑ Cremer, T., Cremer, C. (2001). «Chromosome territories, nuclear architecture and gene regulation in mammalian cells». Nat Rev Genet 2 (4): 292-301. PMID 11283701. doi:10.1038/35066075. 
  115. ↑ Pál, C., Papp, B., Lercher, M. (2006). «An integrated view of protein evolution». Nat Rev Genet 7 (5): 337-48. PMID 16619049. doi:10.1038/nrg1838. 
  116. ↑ O'Driscoll, M., Jeggo, P. (2006). «The role of double-strand break repair - insights from human genetics». Nat Rev Genet 7 (1): 45-54. PMID 16369571. doi:10.1038/nrg1746. 
  117. ↑ Vispé, S., Defais, M. (1997). «Mammalian Rad51 protein: a RecA homologue with pleiotropic functions». Biochimie 79 (9-10): 587-92. PMID 9466696. doi:10.1016/S0300-9084(97)82007-X. 
  118. ↑ Neale MJ, Keeney S (2006). «Clarifying the mechanics of DNA strand exchange in meiotic recombination». Nature 442 (7099): 153-8. PMID 16838012. doi:10.1038/nature04885. 
  119. ↑ Dickman, M., Ingleston, S., Sedelnikova, S., Rafferty, J., Lloyd, R., Grasby, J., Hornby, D. (2002). «The RuvABC resolvasome». Eur J Biochem 269 (22): 5492-501. PMID 12423347. doi:10.1046/j.1432-1033.2002.03250.x. 
  120. ↑ Joyce, G. (2002). «The antiquity of RNA-based evolution». Nature 418 (6894): 214-21. PMID 12110897. doi:10.1038/418214a. 
  121. ↑ Orgel, L. «Prebiotic chemistry and the origin of the RNA world». Crit Rev Biochem Mol Biol 39 (2): 99-123. PMID 15217990. doi:10.1080/10409230490460765. 
  122. ↑ Davenport, R. (2001). «Ribozymes. Making copies in the RNA world». Science 292 (5520): 1278. PMID 11360970. doi:10.1126/science.292.5520.1278a. 
  123. ↑ Szathmáry, E. (1992). «What is the optimum size for the genetic alphabet?». Proc Natl Acad Sci U S A 89 (7): 2614-8. PMID 1372984. doi:10.1073/pnas.89.7.2614. 
  124. ↑ Lindahl, T. (1993). «Instability and decay of the primary structure of DNA». Nature 362 (6422): 709-15. PMID 8469282. doi:10.1038/362709a0. 
  125. ↑ Vreeland, R., Rosenzweig, W., Powers, D. (2000). «Isolation of a 250 million-year-old halotolerant bacterium from a primary salt crystal». Nature 407 (6806): 897-900. PMID 11057666. doi:10.1038/35038060. 
  126. ↑ Hebsgaard, M., Phillips, M., Willerslev, E. (2005). «Geologically ancient DNA: fact or artefact?». Trends Microbiol 13 (5): 212-20. PMID 15866038. doi:10.1016/j.tim.2005.03.010. 
  127. ↑ Nickle, D., Learn, G., Rain, M., Mullins, J., Mittler, J. (2002). «Curiously modern DNA for a “250 million-year-old” bacterium». J Mol Evol 54 (1): 134-7. PMID 11734907. doi:10.1007/s00239-001-0025-x. 
  128. ↑ Birnbaum, D., Coulier, F., Pébusque, M. J., Pontarotti, P. (2000). «“Paleogenomics”: looking in the past to the future». J Exp Zool. 288 ((1):). 21-2.  [1]
  129. ↑ Blanchette, M., Green, E. D., Miller, W., Haussler, D. (2004). «Reconstructing large regions of an ancestral mammalian genome in silico». Genome Res. 14 ((12):). 2412-23.  Erratum in: Genome Res. 2005 Mar;15(3):451.[2]
  130. ↑ Gaucher, Eric A.; Thomson, J. Michael; Burgan, Michelle F.; Benner, Steven A. (18 de septiembre de 2003). «Inferring the palaeoenvironment of ancient bacteria on the basis of resurrected proteins». Nature 425 (6955): 285-288. ISSN 1476-4687. PMID 13679914. doi:10.1038/nature01977. Consultado el 23 de agosto de 2024. 
  131. ↑ Thornton, Joseph W. (Mayo de 2004). «Resurrecting ancient genes: experimental analysis of extinct molecules». Nature Reviews. Genetics 5 (5): 366-375. ISSN 1471-0056. PMID 15143319. doi:10.1038/nrg1324. Consultado el 23 de agosto de 2024. 
  132. ↑ Benner, Steven A.; Caraco, M. Daniel; Thomson, J. Michael; Gaucher, Eric A. (3 de mayo de 2002). «Planetary biology--paleontological, geological, and molecular histories of life». Science (New York, N.Y.) 296 (5569): 864-868. ISSN 1095-9203. PMID 11988562. doi:10.1126/science.1069863. Consultado el 23 de agosto de 2024. 
  133. ↑ Brenner, S. A., Carrigan, M. A., Ricardo, A., Frye, F. (2006). «Setting the stage: the history, chemistry and geobiology behind RNA». The RNA World, 3rd Ed. Cold Spring Harbor Laboratory Press. ISBN 0-87969-739-3. [3] Archivado el 10 de agosto de 2011 en Wayback Machine.
  134. ↑ a b c Griffiths, J. F. A. et al. (2002). Genética. McGraw-Hill Interamericana. ISBN 84-486-0368-0. 
  135. ↑ a b Watson, J. D.; Baker, T. A.; Bell, S. P.; Gann, A.; Levine, M. y Losick, R. (2004). Molecular Biology of the Gene (Fifth edition edición). San Francisco: Benjamin Cummings. ISBN 0-321-22368-3. 
  136. ↑ Sanger, F., Coulson, A. R. «A rapid method for determining sequences in DNA by primed synthesis with DNA polymerase.» J Mol Biol. 1975 Mayo 25;94(3):441-448.
  137. ↑ Sanger, F., Nicklen, S., y Coulson, A. R., «DNA sequencing with chain-terminating inhibitors.» Proc Natl Acad Sci U S A, diciembre de 1977; 74(12): 5463-5467.
  138. ↑ «Bartlett & Stirling (2003) «A Short History of the Polymerase Chain Reaction.» En: Methods Mol Biol. 226:3-6.». Archivado desde el original el 24 de diciembre de 2007. Consultado el 14 de abril de 2008. 
  139. ↑ Southern, E. M. (1975): «Detection of specific sequences among DNA fragments separated by gel electrophoresis.» J Mol Biol., 98:503-517. PMID 1195397
  140. ↑ Alwine, J. C., Kemp, D. J., Stark, G. R. (1977). «Method for detection of specific RNAs in agarose gels by transfer to diazobenzyloxymethyl-paper and hybridization with DNA probes». Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 74 (12): 5350-4. PMID 414220. doi:10.1073/pnas.74.12.5350. 
  141. ↑ Neal Burnette, W. (abril de 1981). «'Western blotting': electrophoretic transfer of proteins from sodium dodecyl sulfate — polyacrylamide gels to unmodified nitrocellulose and radiographic detection with antibody and radioiodinated protein A». Analytical Biochemistry (United States: Academic Press) 112 (2): 195-203. ISSN 0003-2697. PMID 6266278. doi:10.1016/0003-2697(81)90281-5. Archivado desde el original el 14 de mayo de 2008. Consultado el 3 de abril de 2008. 
  142. ↑ Miller, W. L. (1979). «Use of recombinant DNA technology for the production of polypeptides». Advances in Experimental Medicine and Biology 118: 153-174. ISSN 0065-2598. PMID 91311. doi:10.1007/978-1-4684-0997-0_16. Consultado el 30 de septiembre de 2023. 
  143. ↑ Leader, Benjamin; Baca, Quentin J.; Golan, David E. (Enero de 2008). «Protein therapeutics: a summary and pharmacological classification». Nature Reviews. Drug Discovery 7 (1): 21-39. ISSN 1474-1784. PMID 18097458. doi:10.1038/nrd2399. Consultado el 30 de septiembre de 2023. 
  144. ↑ Dingermann, Theo (Enero de 2008). «Recombinant therapeutic proteins: production platforms and challenges». Biotechnology Journal 3 (1): 90-97. ISSN 1860-7314. PMID 18041103. doi:10.1002/biot.200700214. Consultado el 30 de septiembre de 2023. 
  145. ↑ Voigt, Katrin; Izsvák, Zsuzsanna; Ivics, Zoltán (Noviembre de 2008). «Targeted gene insertion for molecular medicine». Journal of Molecular Medicine (Berlin, Germany) 86 (11): 1205-1219. ISSN 0946-2716. PMID 18607557. doi:10.1007/s00109-008-0381-8. Consultado el 30 de septiembre de 2023. 
  146. ↑ Houdebine, Louis-Marie (2007). «Transgenic animal models in biomedical research». Methods in Molecular Biology (Clifton, N.J.) 360: 163-202. ISSN 1064-3745. PMID 17172731. doi:10.1385/1-59745-165-7:163. Consultado el 30 de septiembre de 2023. 
  147. ↑ Soler, Eric; Thépot, Dominique; Rival-Gervier, Sylvie; Jolivet, Geneviève; Houdebine, Louis-Marie (Septiembre de 2006). «Preparation of recombinant proteins in milk to improve human and animal health». Reproduction Nutrition Development 46 (5): 579-588. ISSN 0926-5287. doi:10.1051/rnd:2006029. Consultado el 30 de septiembre de 2023. 
  148. ↑ Chávez, A.; Muñoz de Chávez, M. (Septiembre de 2003). «Nutrigenomics in public health nutrition: short-term perspectives». European Journal of Clinical Nutrition (en inglés) 57 (1): S97-S100. ISSN 1476-5640. doi:10.1038/sj.ejcn.1601809. Consultado el 30 de septiembre de 2023. 
  149. ↑ Vasil, Indra K. (Agosto de 2007). «Molecular genetic improvement of cereals: transgenic wheat (Triticum aestivum L.)». Plant Cell Reports 26 (8): 1133-1154. ISSN 0721-7714. PMID 17431631. doi:10.1007/s00299-007-0338-3. Consultado el 30 de septiembre de 2023. 
  150. ↑ Daniell, H., Dhingra, A. (2002). «Multigene engineering: dawn of an exciting new era in biotechnology». Curr Opin Biotechnol 13 (2): 136-41. PMID 11950565. doi:10.1016/S0958-1669(02)00297-5. 
  151. ↑ Job D (2002). «Plant biotechnology in agriculture». Biochimie 84 (11): 1105-10. PMID 12595138. doi:10.1016/S0300-9084(02)00013-5. 
  152. ↑ Collins, A., Morton, N. (1994). «Likelihood ratios for DNA identification». Proc Natl Acad Sci USA 91 (13): 6007-11. PMID 8016106. doi:10.1073/pnas.91.13.6007. 
  153. ↑ Weir, B., Triggs, C., Starling, L., Stowell, L., Walsh, K., Buckleton, J. (1997). «Interpreting DNA mixtures». J Forensic Sci 42 (2): 213-22. PMID 9068179. 
  154. ↑ Jeffreys, A., Wilson, V., Thein, S. (1985). «Individual-specific 'fingerprints' of human DNA». Nature 316 (6023): 76-9. PMID 2989708. doi:10.1038/316076a0. 
  155. ↑ «Colin Pitchfork — first murder conviction on DNA evidence also clears the prime suspect.» Forensic Science Service. Consultado el 23 de diciembre de 2006.
  156. ↑ «DNA Identification in Mass Fatality Incidents». National Institute of Justice. septiembre de 2006. Archivado desde el original el 12 de noviembre de 2006. 
  157. ↑ Bhattacharya, Shaoni. «Killer convicted thanks to relative's DNA». newscientist.com (20 abril 2004). Consultado el 22 de diciembre de 2006.
  158. ↑ Baldi, Pierre; Brunak, Soren (2001). Bioinformatics: The Machine Learning Approach. MIT Press. ISBN 978-0-262-02506-5. 
  159. ↑ Gusfield, Dan. Algorithms on Strings, Trees, and Sequences: Computer Science and Computational Biology. Cambridge University Press, 15 January 1997. ISBN 978-0-521-58519-4.
  160. ↑ Sjölander, K. (2004). «Phylogenomic inference of protein molecular function: advances and challenges». Bioinformatics 20 (2): 170-9. PMID 14734307. doi:10.1093/bioinformatics/bth021. 
  161. ↑ Mount, D. M. (2004). Bioinformatics: Sequence and Genome Analysis (2 edición). Cold Spring Harbor, NY: Cold Spring Harbor Laboratory Press. ISBN 0879697121. 
  162. ↑ Yin, Peng; Hariadi, Rizal F.; Sahu, Sudheer; Choi, Harry M. T.; Park, Sung Ha; LaBean, Thomas H.; Reif, John H. (8 de agosto de 2008). «Programming DNA Tube Circumferences». Science (en inglés) 321 (5890): 824-826. ISSN 0036-8075. doi:10.1126/science.1157312. Consultado el 30 de septiembre de 2023. 
  163. ↑ Modelos de ADN en papiroflexia realizados en el Sanger Center (UK) [4]
  164. ↑ Wray, G. (2002). «Dating branches on the tree of life using DNA». Genome Biol 3 (1): REVIEWS0001. PMID 11806830. doi:10.1046/j.1525-142X.1999.99010.x. 
  165. ↑ «Lost Tribes of Israel - Broadcast Transcript Nova (TV series)». PBS.org. 22 de Febrero de 2000. Archivado desde el original el 8 de noviembre de 2001. Consultado el 4 marzo de 2006). 
  166. ↑ Kleiman, Yaakov (13 de enero de 2000). «The Cohanim - DNA Connection: The fascinating story of how DNA studies confirm an ancient biblical tradition». aish.com. Archivado desde el original el 25 de abril de 2016. Consultado el 4 de marzo de 2006. 

Bibliografía

editar

Enlaces externos

editar
Obtenido de «https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Ácido_desoxirribonucleico&oldid=163431652»